Oshima-Franco, YokoAssunção, Jaqueline de Cássia ProençaAssunção, Jaqueline de Cássia Proença2024-07-302024-07-302021https://repositorio.uniso.br/handle/uniso/1549Introdução: As nanopartículas de prata (AgNPs) despertam interesse principalmente pela sua propriedade antibacteriana e são produzidas pela ação de agentes redutores sobre íons prata. Em plena era da química verde que busca eliminar o uso e geração de substâncias nocivas à saúde humana e ao ambiente, a curcumina proveniente da Curcuma longa tem sido utilizada como um precursor para a obtenção de AgNPs promissoras nos estudos em venenos ofídicos. A serpente Philodryas olfersii é conhecida como não peçonhenta devido à sua dentição opistóglifa, entretanto, seu veneno produz edema, eritema, hemorragia e muita dor quando ocorrem acidentes em humanos. Tendo em vista que o tratamento convencional para acidentes ofídicos (soro antiofídico) não se mostra eficaz contra efeitos locais, que são os principais efeitos do veneno de P. olfersii, é importante a busca por novos compostos com potencial ação antiofídica. Objetivos: Os objetivos deste estudo foram avaliar a toxicidade de AgNPs sintetizadas com curcumina por meio do ensaio de mutagenicidade e, farmacologicamente, avaliar a sua influência contra os efeitos neurotóxico e miotóxico ex vivo do veneno da serpente P. olfersii (Colubridae). Metodologia: O delineamento do estudo foi in vitro e com animais (CEUA/Uniso 159/2019). Definida a toxicidade preliminar das AgNPs sintetizadas com curcumina (0,081 mg/mL-130 nm), a mutagenicidade foi avaliada pelo parâmetro Salmonella/microssoma (Teste de Ames) utilizando-se as linhagens de Salmonella typhimurium TA97a, TA98, TA100 e TA102, com e sem ativação metabólica, em triplicata e na presença de controles positivo, negativo e espontâneo. O estudo farmacológico foi realizado em preparações Biventer cervicis de pintainhos, por meio de técnica miográfica convencional e adições exógenas de acetilcolina (ACh) e cloreto de potássio (KCl) . Para avaliar a miotoxicidade, alíquotas foram retiradas do banho para a dosagem da enzima creatinoquinase (CK). Os resultados foram analisados estatisticamente e considerados significativos os valores com p<0,05. Resultados: As AgNPs sintetizadas com curcumina foram eficientes com apenas 0,0162 ng/mL, quando pré- incubada por 30 minutos com 50 µg/mL do veneno de P. olfersii. Esta mistura protegeu contra o bloqueio das contrações e contraturas (ACh e KCl) na preparação Biventer cervicis de pintainho. Sua eficiência também foi importante na preservação pós-sináptica, pois o veneno afeta os receptores pós-sinápticos e a membrana do sarcoplasma, demonstrados pelas respostas contraturantes de ACh e KCl. A dosagem de CK liberada no banho contendo a preparação neuromuscular, frente aos diferentes protocolos experimentais, não foi estatisticamente diferente do controle de Krebs. Conclusão: As AgNPs foram eficazes contra o bloqueio neuromuscular em B. cervicis contra as injúrias causadas pelo veneno da P. olfersii e não mostraram-se seguras pelo parâmetro do teste de Ames. Nos ensaios em bactérias, as AgNPs mostraram-se não mutagênicas na ausência do sistema microssomal, porém, mutagênicas na presença de ativação microssomal. A dosagem de creatinoquinase não se mostrou um bom biomarcador quando realizadas em amostras coletadas do banho contendo a preparação neuromuscular.Introduction: Silver nanoparticles (AgNPs) are of particular interest for their antibacterial properties and are produced by the action of reducing agents on silver ions. In the midst of green chemistry that seeks to eliminate the use and generation of substances harmful to human health and the environment, curcumin from Curcuma longa has been used as a precursor to obtain promising AgNPs in studies on snake venoms. The Philodryas olfersii snake is known as non-venomous due to its opisthoglyphic dentition, however, its venom produces edema, erythema, hemorrhage and a lot of pain when accidents occur in humans. Bearing in mind that the conventional treatment for snakebites (anti-ophidic serum) is not effective against local effects, which are the main effects of the P. olfersii venom, it is important to search for new compounds with potential anti-ophidic action. Objectives: The objectives of this study were to evaluate the toxicity of AgNPs synthesized with curcumin through the mutagenicity assay and, pharmacologically, to evaluate its influence against the ex vivo neurotoxic and myotoxic effects of the snake venom P. olfersii (Colubridae). Methodology: The study design was in vitro and with animals (CEUA / Uniso 159/2019). After defining the preliminary toxicity of AgNPs synthesized with curcumin (0.081 mg / mL-130 nm), mutagenicity was assessed by the parameter Salmonella/ microsome (Ames test) using the Salmonella typhimurium strains TA97a, TA98, TA100 and TA102, with and without metabolic activation, in triplicate and in the presence of positive, negative and spontaneous controls. The pharmacological study was carried out on Biventer cervicis preparations of chicks, using a conventional myographic technique and exogenous additions of acetylcholine (ACh) and potassium chloride (KCl). To assess myotoxicity, aliquots were removed from the bath to measure the creatine kinase (CK) enzyme. The results were statistically analyzed and values with p <0.05 were considered significant. Results: AgNPs synthesized with curcumin were efficient with only 0.0162 ng/mL, when pre-incubated for 30 minutes with 50 µg / ml of P. olfersii venom. This mixture protected against the blocking of contractions and contractures (ACh and KCl) in the preparation Biventer cervicis of chick. Its efficiency was also important in the post-synaptic preservation, since the poison affects the postsynaptic receptors and the sarcoplasm membrane, demonstrated by the contracting responses of ACh and KCl. The dosage of CK released in the bath containing the neuromuscular preparation, compared to the different experimental protocols, was not statistically different from the Krebs control. Conclusion: AgNPs were effective against neuromuscular block in B. cervicis against injuries caused by the P. olfersii venom and were not shown to be safe by the Ames test parameter. In bacterial assays, AgNPs proved to be non-mutagenic in the absence of the microsomal system, however, mutagenic in the presence of microsomal activation. The measurement of creatine kinase was not shown to be a good biomarker when performed on samples collected from the bath containing the neuromuscular preparation.Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 BrazilNanopartículasNanotecnologiaPrataCobra venenosa - VenenoDissertaçãoFARMÁCIA