Produção de hidrofobinas: comparação entre cepa selvagem e recombinante de Aspergillus oryzae

As hidrofobinas são proteínas anfifílicas produzidas por fungos filamentosos, amplamente exploradas por suas propriedades de autoagregação, adesão a superfícies e funcionalização de materiais. Este trabalho teve como objetivo comparar a produção e a extração de hidrofobinas expressas em Aspergillus oryzae, tanto em cepas recombinantes quanto na cepa selvagem RIB40, com foco na recuperação da hidrofobina RolA e da proteína TUB, que possui função semelhante, embora não contenha os resíduos de cisteína conservados típicos das hidrofobinas. As cepas recombinantes foram cultivadas em meio mínimo, com indução da expressão por adição de maltose, enquanto a cepa RIB40 foi utilizada como controle positivo para secreção natural da RolA. A extração da RolA da RIB40 com ácido fórmico foi bemsucedida, permitindo sua detecção por SDS-PAGE e confirmação por espectrometria de massas. Nas cepas recombinantes, a precipitação com sulfato de amônio não permitiu a visualização clara das proteínas, mas a RolA foi detectada diretamente no sobrenadante da cultura no SDS-PAGE e posteriormente purificada com sucesso por cromatografia de afinidade. A TUB também foi visualizada em SDS-PAGE, com massa compatível com sua forma madura (aprox. 17 kDa). Os resultados indicam que ambas as proteínas foram secretadas pelas cepas recombinantes e recuperadas diretamente do meio, dispensando etapas agressivas de extração. Essa característica representa uma vantagem para aplicações industriais, permitindo a simplificação do processo, redução de custos e menor uso de solventes potencialmente tóxicos.