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Item type: search.filters.itemtype.Dissertação Phagevet : isolamento, caracterização e aplicação terapêutica de bacteriófagos líticos para Escherichia coli em medicina veterinária(2022)Silva, Bianca Gianola BellineEscherichia coli (E. coli) é uma das bactérias mais prevalentes nas infecções que acometem animais domésticos, sendo amplamente relacionada à redução da eficiência reprodutiva. Na clínica de cães e gatos, a infecção uterina é chamada de piometra, sua evolução pode cursar com sepse e óbito, sendo o tratamento de eleição a ovariohisterectomia, em razão da resposta ineficaz a antibioticoterapia. O aumento da pressão de seleção e resistência bacteriana, associado a escassez de novos antibióticos, torna urgente a busca de alternativas terapêuticas, como a fagoterapia que se baseia na ação de bacteriófagos. Objetivou-se neste trabalho isolar e caracterizar por análises físicas, biológicas e moleculares, dois novos fagos vB_EcoM_Uniso11 (ph0011) e vB_EcoM_Uniso21 (ph0021), usando Escherichia coli Cefar CCCD-E003 como hospedeira. Após ampla caracterização, procedeu-se a estabilização estrutural e funcional dos fagos num coquetel, integrado num sistema de delivery do tipo óvulo vaginal, para aplicações terapêuticas em gatas e cadelas. Ambos os fagos isolados pertencem à ordem Caudovirales, sendo classificados como Myoviridae; fago ph0011 do gênero Asteriusvirus e fago ph0021 do gênero Tequatrovírus. Seus genomas de 348.288 pb (fago ph0011) e 165.222 pb (fago ph0021) não codificam toxinas, despolimerases, genes de integrases ou genes de resistência. Fagos ph0011 e ph0021 apresentaram boa replicação em E. coli e foram eficazes em ensaios de atividade antibacteriana in vitro e ex vivo, não infectando cepas de outras espécies bacterianas, denotando especificidade. O aumento da multiplicidade de infecção (MOI) de 1 para 1000 promoveu significativa eficiência in vitro e retardou o recrescimento de bactérias, enquanto nos ensaios ex vivo o aumento do MOI de 10 para 100 resultou em redução significativa da carga bacteriana. Embora ambos os fagos denotem potencial para controlar infecções por E. coli., fago ph0011 (redução de 4.24log UFC/mL) foi mais eficaz que fago ph0021 (redução de 1,90log UFC/mL) após 12h de incubação em MOI de 1000. Utilizados em forma de coquetel, foram altamente eficazes no controle da bactéria (redução de 5,57 log UFC/mL) em MOI de 100, após 12h de tratamento. Este estudo evidencia que os fagos isolados são potencialmente promissores contra infecções por E. coli, destacando sua estabilização estrutural e funcional em formulações do tipo óvulos vaginais.Item type: search.filters.itemtype.Dissertação Avaliação das diferentes atividades tóxicas do veneno de Micrurus spixii, e a eficácia de neutralização do soro antielapídico, varespladib e neostigmina através de estudo in vitro, in vivo e ex vivo.(2024)Cantuária, Nathalia MargaridaFrente à questão global de saúde pública envolvendo os acidentes ofídicos e alinhado à proposta da Organização Mundial de Saúde em reduzir a 50% até 2030 as consequências nefastas do envenenamento, este trabalho avaliou a eficácia do Varespladib (VPL) como proposta alternativa e, indiretamente reforçar através de evidências experimentais o seu redirecionamento. O VPL é um inibidor de fosfolipases (PLA2) e tem se mostrado eficaz contra as atividades tóxicas de diferentes venenos ofídicos ricos em PLA2. Os venenos das serpentes do gênero Micrurus são conhecidos por apresentar potente atividade neurotóxica, podendo levar ao óbito por paralisia respiratória grave. Existem duas principais neurotoxinas presentes nesses venenos, com variações nas concentrações e atividades, entre as diversas espécies. A Micrurus spixii (M. spixii) é uma cobra coral que habita a região amazônica no Brasil, conhecida como coral amazônica. O estado da arte sobre a composição deste veneno é a existência de toxinas que atuam tanto em nível pré- como pós-sináptico. No primeiro, atua através do conteúdo de PLA2 que inibe a liberação de acetilcolina pelo neurônio motor; no segundo, através da ação sobre receptores nicotínicos, a exemplo das toxinas de três dígitos (3FTxs) ou -neurotoxinas, o veneno leva à paralisia neuromuscular por esses dois principais mecanismos. Dessa forma estabeleceu-se o racional teórico deste estudo pela associação de Varespladib à Neostigmina (um agente anticolinesterásico), para avaliar a sua eficácia sobre esses dois alvos moleculares. Foram realizados ensaios para caracterização bioquímica do veneno (quantificação de proteínas totais e eletroforese em SDS-PAGE), tromboelastometria in vitro para averiguar a atividade anticoagulante sobre plasma humano, ensaios in vivo para avaliar as atividades letais e miotóxicas e ensaios ex vivo em preparações neuromusculares de ave. Soro antielapídico comercial foi utilizado em todo o estudo como referência. O teor proteico do veneno foi de 1,59 ± 0,09 mg/mL. Duas bandas majoritárias foram encontradas na eletroforese em SDS-PAGE, indicando a presença de PLA2 e 3FTx. O veneno apresentou potente atividade anticoagulante sobre o plasma humano in vitro, assim como apresentou alta atividade miotóxica, e elevada letalidade in vivo. Também foi observado o bloqueio neuromuscular em preparações ex vivo, além do bloqueio das respostas contraturantes sobre ACh e KCl exógenos. O soro antielapídico foi totalmente eficaz contra a letalidade, mas nas demais atividades a eficácia foi parcial. Os resultados mostraram que o VPL foi mais eficaz nas atividades que dependiam da ação da PLA2, como nas atividades anticoagulante e miotóxica. Houve um efeito sinérgico entre o VPL e o soro potencializando a eficácia de ambos. O VPL não apresentou eficiência contra a atividade letal do veneno de M. spixii, e, apresentou eficácia parcial contra o bloqueio neuromuscular nos ensaios miográficos. Esses dois resultados interpretados em conjunto indicam que essas atividades dependem exclusiva ou preponderantemente da ação de α-neurotoxinas pós-sinápticas. A Neostigmina não apresentou eficácia no ensaio de letalidade, nas condições utilizadas, e sugere-se que sua indicação seja revista. Os resultados do presente estudo mostram que o VPL pode ser utilizado como uma alternativa complementar à soroterapia.Item type: search.filters.itemtype.Tese Visualização da aprendizagem e organização da informação educacional : um modelo conceitual para o acompanhamento da aprendizagem em ambientes digitais(2026)Carriel, Gerson NunhoEsta pesquisa propõe um modelo conceitual de organização e representação da informação educacional utilizando visualização da aprendizagem para apoiar estudantes e professores no acompanhamento do processo de aprendizagem em ambientes digitais. A pesquisa parte da compreensão de que ambientes educacionais digitais produzem grande volume de dados relacionados a conteúdos, conhecimentos, avaliações e informações de aprendizagem, mas nem sempre oferecem mecanismos que favoreçam a interpretação integrada dessas informações ao longo do percurso formativo. O modelo proposto adota os conhecimentos como elemento central de articulação entre conteúdos, avaliações, informações de aprendizagem e representações visuais. Como operacionalização da proposta, foi desenvolvido o Adapt-Vis, ambiente integrado ao Moodle por meio do padrão Learning Tools Interoperability (LTI), concebido para organizar relacionalmente conteúdos, conhecimentos, atividades avaliativas e mecanismos de personalização, permitindo gerar representações visuais voltadas ao acompanhamento do percurso formativo dos estudantes. O sistema incorpora mecanismos de personalização baseados no modelo Index of Learning Styles (ILS) e diferentes representações visuais voltadas ao acompanhamento da aprendizagem. A aplicação foi realizada em contexto educacional real com estudantes dos cursos de Licenciatura em Matemática e Tecnologia em Sistemas para Internet do Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia de São Paulo – Campus Itapetininga, possibilitando a operacionalização do modelo proposto em uma disciplina ofertada em ambiente digital de aprendizagem. Os resultados evidenciam a viabilidade da proposição, da operacionalização computacional e da aplicação do modelo conceitual, demonstrando a possibilidade de organizar e representar informações educacionais por meio de uma estrutura integrada voltada ao acompanhamento da aprendizagem. Os achados evidenciam o potencial da organização e representação da informação educacional, associadas à visualização da aprendizagem, como estratégias de apoio ao acompanhamento da aprendizagem em ambientes digitais.