Navegando por Assunto "Prata"
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- TeseBiossíntese de nanopartículas de prata utilizando Kalanchoe pinnata visando a aplicação em hidrogéis para o combate de bactérias resistentes(2020) Feitosa, Leandro OliveiraAs bactérias resistentes a antibióticos tornaram-se um grande desafio para a saúde pública devido à dificuldade de combatê-las. Na busca por novas alternativas, as nanopartículas de prata (AgNPs) surgem como uma das possibilidades para ajudar nesta situação. A ação antibacteriana da prata é conhecida há anos, no entanto, o seu potencial é ampliado quando em escala nanométrica. Assim, as AgNPs podem ser uma promissora opção contra as bactérias resistentes. Este trabalho teve como objetivo realizar a síntese de AgNPs biogênica utilizando extrato de Kalanchoe pinnata com a intenção de ajudar a comprovar a eficácia das AgNPs contra bactérias resistentes. Também avaliar toxicidade in vitro e propor a aplicação das AgNPs em hidrogéis para futura utilização de tratamentos de feridas cutâneas. Inicialmente, foi realizada a otimização da síntese de AgNPs de modo a selecionar os melhores parâmetros para isto. Deste modo, foram realizadas a caracterização físico-química das AgNPs utilizando as técnicas de espalhamento dinâmico de luz (DLS) e análise de rastreamento de nanopartículas (NTA). A atividade antibacteriana foi comprovada através do teste de disco-difusão em ágar e concentração mínima inibitória. A eficácia das AgNPs foi confirmada com ensaios de cinética de crescimento com bactérias resistentes. Para avaliar a citotoxicidade foram realizados os testes de redução de tetrazólio (MTT) e vermelho neutro. E para avaliar a genotoxicidade, utilizamos os testes de Allium cepa e ensaio do Cometa. Também foi testado a possibilidade de alergias através de expressão gênica de genes ligados a formação de inflamossomos e quimiocinas. Os resultados mostraram que a melhor condição de síntese de AgNPs foi na concentração de 0,06 mg.mL-1 de extrato de K. pinnata, pH 9 e AgNO3 a 1mM. Logo, geraram AgNPs com tamanho de 121 ± 6,5 nm, polidispersão 0,2 ± 0,1 pdi, potencial zeta de -23 ± 0,1 mV e concentração de 9 × 1010 Np.mL-1. As AgNPs foram eficazes contra bactérias resistentes a partir de concentrações de 0,9 × 10 10 Np.mL-1 . As AgNPs conseguiram interromper a formação de biofilme e inibir o crescimento bacteriano durante 24 h. Não apresentaram citotoxicidade in vitro até a concentração de 3 × 1010 Np.mL-1. Apresentaram efeitos genotóxicos em raízes de Allium cepa em altas concentrações e no ensaio de cometa com células animais a partir da concentração de 0,9 × 1010 Np.mL-1 e indica alteração na expressão dos genes. As AgNPs foram incorporadas em hidrogéis poliméricos de polaxamer, e isto melhorou os perfis reológicos dos géis tanto em função da frequência quanto da temperatura, desta maneira, modificou a viscosidade e comportamento não Newtoniano do sistema. Ainda, os géis apresentaram ação antibacteriana, mostrando serem eficazes contra bactérias resistentes através do contato direto. Tendo em vista os resultados, as AgNPs de extrato de K. pinnata são eficazes contra bactérias resistentes, mesmo depois de incorporadas em hidrogéis. Desta forma, são uma excelente alternativa para tratar infecções causadas por bactérias resistentes.
- TeseNanopartículas biogênicas de prata baseadas em Trichoderma harzianum: diferentes condições de síntese, caracterização físico-química, avaliação da cito/genotoxicidade e potencial inibitório de Sclerotinia sclerotiorum(2020) Guilger-Casagrande, MarianaA síntese biogênica de nanopartículas de prata empregando fungos vem se destacando como uma alternativa promissora. Os fungos produzem grande quantidade de proteínas, enzimas e metabólitos secundários que atuam na síntese e formam um recobrimento ao redor das nanopartículas, o qual confere estabilidade e pode contribuir para a atividade contra microrganismos patogênicos. O presente estudo teve como objetivo sintetizar nanopartículas de prata a partir do filtrado do fungo Trichoderma harzianum e analisar sua potencial aplicação no controle do fungo fitopatogênico Sclerotinia sclerotiorum e os efeitos sobre plantas de soja. Para tanto, a síntese das nanopartículas foi realizada utilizando filtrados de T. harzianum com e sem estímulo da atividade de enzimas hidrolíticas pela parede celular de S. sclerotiorum. Em seguida foi realizada a remoção do recobrimento das nanopartículas para comparar nanopartículas recobertas e não-recobertas, obtendo quatro diferentes amostras, que foram analisadas quanto aos parâmetros físico-químicos. Os ensaios SDS-PAGE, ensaios de atividade de enzimas hidrolíticas de T. harzianum e a análise FTIR foram realizados para investigar as características dos recobrimentos. Também foram realizados ensaios com linhagens celulares e organismos não-alvo (germinação da soja, microrganismos de importância agrícola e microbiota do solo envolvida no ciclo do nitrogênio) visando a avaliação da citotoxidade e genotoxicidade das nanopartículas. A atividade biológica das nanopartículas para o controle de S. sclerotiorum foi avaliada in vitro, utilizando meio de cultura suplementado com as nanopartículas. Para investigar os efeitos sobre a soja, foi realizado plantio em solo previamente exposto às nanopartículas e após o crescimento foram avaliados parâmetros relacionados à morfologia, trocas gasosas e estresse oxidativo. A síntese e a remoção do recobrimento foram bem-sucedidas, sendo confirmadas por UV-Visível e FTIR. Foram observadas alterações nos parâmetros físico-químicos, principalmente ao comparar nanopartículas recobertas e nãorecobertas, tendo ocorrido um aumento no diâmetro destas últimas, que pode indicar agregação e perda da estabilidade. Pelo ensaio SDS-PAGE, bandas de proteína em comum foram identificadas para os filtrados e seus respectivos recobrimentos, confirmando que as proteínas do filtrado permanecem envolvendo as nanopartículas. Também foi observada atividade específica de enzimas hidrolíticas de T. harzianum nos filtrados, recobrimentos e nanopartículas recobertas. Quanto à citotoxidade e genotoxidade, as nanopartículas recobertas apresentaram menores efeitos para as linhagens celulares e organismos não-alvo em comparação com as nãorecobertas. Em relação ao controle de S. sclerotiorum, as nanopartículas recobertas sintetizadas com estímulo mostraram maior potencial inibitório sobre o crescimento micelial, entretanto ambas inibiram o desenvolvimento de novos escleródios, enquanto as nanopartículas nãorecobertas não apresentaram efetividade. Foram observadas algumas alterações nos parâmetros morfológicos e fisiológicos das plantas de soja expostas as nanopartículas, porém estas podem estar relacionadas a uma possível resposta adaptativa. Os resultados indicam o potencial de nanopartículas de prata biogênicas para o controle de fitopatógenos, com efeitos bastante reduzidos sobre organismos não-alvo, de uma forma mais ambientalmente amigável em relação a produtos convencionais, sendo promissores pois abrem caminho para novas investigações em direção à aplicação desse tipo de nanomaterial no controle de fitopatógenos que afetam a produção agrícola.
- DissertaçãoNanopartículas de prata (AGNPS): mutagenicidade e influência sobre os efeitos tóxicos do veneno da serpente Philodryas olfersii (Colubridae)(2021) Assunção, Jaqueline de Cássia ProençaIntrodução: As nanopartículas de prata (AgNPs) despertam interesse principalmente pela sua propriedade antibacteriana e são produzidas pela ação de agentes redutores sobre íons prata. Em plena era da química verde que busca eliminar o uso e geração de substâncias nocivas à saúde humana e ao ambiente, a curcumina proveniente da Curcuma longa tem sido utilizada como um precursor para a obtenção de AgNPs promissoras nos estudos em venenos ofídicos. A serpente Philodryas olfersii é conhecida como não peçonhenta devido à sua dentição opistóglifa, entretanto, seu veneno produz edema, eritema, hemorragia e muita dor quando ocorrem acidentes em humanos. Tendo em vista que o tratamento convencional para acidentes ofídicos (soro antiofídico) não se mostra eficaz contra efeitos locais, que são os principais efeitos do veneno de P. olfersii, é importante a busca por novos compostos com potencial ação antiofídica. Objetivos: Os objetivos deste estudo foram avaliar a toxicidade de AgNPs sintetizadas com curcumina por meio do ensaio de mutagenicidade e, farmacologicamente, avaliar a sua influência contra os efeitos neurotóxico e miotóxico ex vivo do veneno da serpente P. olfersii (Colubridae). Metodologia: O delineamento do estudo foi in vitro e com animais (CEUA/Uniso 159/2019). Definida a toxicidade preliminar das AgNPs sintetizadas com curcumina (0,081 mg/mL-130 nm), a mutagenicidade foi avaliada pelo parâmetro Salmonella/microssoma (Teste de Ames) utilizando-se as linhagens de Salmonella typhimurium TA97a, TA98, TA100 e TA102, com e sem ativação metabólica, em triplicata e na presença de controles positivo, negativo e espontâneo. O estudo farmacológico foi realizado em preparações Biventer cervicis de pintainhos, por meio de técnica miográfica convencional e adições exógenas de acetilcolina (ACh) e cloreto de potássio (KCl) . Para avaliar a miotoxicidade, alíquotas foram retiradas do banho para a dosagem da enzima creatinoquinase (CK). Os resultados foram analisados estatisticamente e considerados significativos os valores com p<0,05. Resultados: As AgNPs sintetizadas com curcumina foram eficientes com apenas 0,0162 ng/mL, quando pré- incubada por 30 minutos com 50 µg/mL do veneno de P. olfersii. Esta mistura protegeu contra o bloqueio das contrações e contraturas (ACh e KCl) na preparação Biventer cervicis de pintainho. Sua eficiência também foi importante na preservação pós-sináptica, pois o veneno afeta os receptores pós-sinápticos e a membrana do sarcoplasma, demonstrados pelas respostas contraturantes de ACh e KCl. A dosagem de CK liberada no banho contendo a preparação neuromuscular, frente aos diferentes protocolos experimentais, não foi estatisticamente diferente do controle de Krebs. Conclusão: As AgNPs foram eficazes contra o bloqueio neuromuscular em B. cervicis contra as injúrias causadas pelo veneno da P. olfersii e não mostraram-se seguras pelo parâmetro do teste de Ames. Nos ensaios em bactérias, as AgNPs mostraram-se não mutagênicas na ausência do sistema microssomal, porém, mutagênicas na presença de ativação microssomal. A dosagem de creatinoquinase não se mostrou um bom biomarcador quando realizadas em amostras coletadas do banho contendo a preparação neuromuscular.
- TeseSíntese química e caracterização de nanopartículas monometálicas de prata e ouro, formulação e caracterização de nanopartículas bimetálicas(2021) Batain, FernandoNanopartículas metálicas (NPMs) e bimetálicas (NPBs) têm propriedades físicas, químicas e biológicas exclusivas e aplicações potenciais para saúde humana e animal, controle de pragas na agricultura e aplicação para dispositivos eletroeletrônicos. Este estudo teve como objetivo sintetizar e caracterizar NPMs de prata (Ag) e ouro (Au), em diferentes temperaturas e tempos de agitação e ainda, formular NPBs de prata e ouro co-estabilizadas pelo Poloxamer P-407® (P407). As propriedades das nanopartículas foram avaliadas quanto à energia plasmônica (espectroscopia UV-Vis), diâmetro hidrodinâmico, índice de polidispersão (espalhamento dinâmico de luz), potencial zeta (espalhamento de luz por fase de PALS) e análise de rastreamento de nanopartículas (NTA). A morfologia e a morfometria das nanopartículas foram analisadas por microscopia de força atômica, microscopia eletrônica de transmissão de alta resolução e microscopia eletrônica de varredura. A caracterização química e a análise elementar foram realizadas por espectroscopia de dispersão de energia de raios-X. A difração de raios-X, a calorimetria exploratória diferencial e espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier contribuíram para a avaliação dos perfis das nanopartículas. Os resultados mostraram que a temperatura de síntese influencia as propriedades físicas e químicas das AgNPs e AuNPs. O P407 contribuiu para formar NPBs de prata e ouro (Ag/Au-NPs). A análise dos resultados levou às seguintes conclusões: (a) a temperatura de síntese e o tempo de agitação podem ser utilizados como parâmetros importantes para controlar as propriedades das NPMs; (b) a formulação de Ag/Au-NPs co-estabilizadas com copolímero anfifílico (P407) apresentou potencial para a formação de sistemas bimetálicos nanoparticulados. No entanto, novos estudos são sugeridos para elucidar a compreensão dos fenômenos envolvidos na abordagem de co-estabilização de sistemas nanoestruturados devem ser realizados para efeitos de comparação com outras formulações.