Desenvolvimento e avaliação de lipossomas como carreadores de grelina para liberação naso-cerebral
| dc.contributor.advisor | Chaud, Marco Vinícius | |
| dc.contributor.author | Barros, Cecilia Torqueti de | |
| dc.date.accessioned | 2023-05-09T20:58:23Z | |
| dc.date.available | 2023-05-09T20:58:23Z | |
| dc.date.issued | 2020 | |
| dc.description.abstract | Introdução: A caquexia é uma síndrome multifatorial caracterizada pela perda contínua de massa muscular esquelética que leva ao comprometimento funcional progressivo. Até o momento, nenhuma intervenção medicamentosa efetiva e aprovada reverte completamente os achados da síndrome caquética. Estudos demonstraram efeitos positivos e encorajadores da grelina (ghrelin – ghrl). No organismo, a ghrl exógena está sujeita a uma degradação muito rápida e as formulações atuais são planejadas para administração parenteral. Como estratégia para superar essas limitações, nosso estudo apresenta a liberação intranasal da ghrl carreada por lipossomas. Objetivos: Desenvolver um sistema lipossomal nanoestruturado para veiculação da ghrl, visando características necessárias para liberação naso-cerebral. Métodos: Os lipossomas foram obtidos pela técnica de hidratação de filmes de fosfolipídios, seguido por extrusão ou homogeneização de alta pressão, e revestidos com quitosana. O tamanho, o potencial elétrico de superfície, a polidispersidade e a eficiência de encapsulação foram parâmetros utilizados para caracterizar os lipossomas. A caracterização morfológica foi realizada por m (CryoTEM). A otimização da formulação foi realizada usando conceitos da abordagem de Qualidade Baseada em Projeto (Quality by Design – QbD). As formulações selecionadas otimizadas foram submetidas a análises ex vivo de permeação e mucoadesão. O tamanho, o índice de polidispersão e a eficiência de encapsulação das formulações otimizadas selecionadas foram estudadas para avaliar a estabilidade durante o período de 60 dias sob refrigeração a 5-8ºC. Resultados: A formulação otimizada de lipossomas carreadores de ghrl e revestido com quitosana foi identificada através de otimização numérica, estabelecendo os critérios alvo de: tamanho (mínimo), índice de polidispersão (IPD) (mínimo), potencial zeta (máximo) e eficiência de encapsulação (EE) (máximo). Os parâmetros selecionados pela otimização foram 70µg/mL de concentração de grelina, 0,3% (m/m) de quitosana e tempo de revestimento de 24 horas. Foram selecionadas a formulação otimizada produzida por homogeneização (Lhomo) e a formulação otimizada produzida por extrusão (Lextru). A formulação Lhomo resultou em lipossomas com 72,25±1,46nm, IPD de 0,300±0,027, potencial zeta de 50,3±1,46 e EE de 53,2%. Enquanto a formulação Lextru resultou em 152,43±0,24nm, IPD de 0,159±0,018, potencial zeta de 60,81±6,61 e EE de 53,6%. As análises dos resultados mostraram que os parâmetros avaliados permaneceram estáveis (p<0,5) durante 60 dias. O revestimento de quitosana melhorou o desempenho das formulações nas análises ex vivo de permeação e mucoadesão, quando comparada às formulações sem revestimento. Apesar da homogeneização de alta pressão resultar em lipossomas menores do que a obtida por extrusão, esse parâmetro não foi significativo nas análises de permeação. Conclusão: Com o método de reidratação do filme fosfolipídico, seguido de pós-processamento, foi possível formar estrutura nanolipossomal, confirmado por cryo-TEM. Com a abordagem QbD foi possível estabelecer os fatores do processo que influenciam nos parâmetros de interesse. Dentre os fatores de formulação que mais influenciaram o tamanho de partícula e a carga de superfície, a concentração de quitosana foi a mais relevante. A concentração de ghrl influência de forma inversa a EE. O revestimento de quitosana foi importante para o desempenho das formulações nas análises ex vivo de permeação e mucoadesão. | por |
| dc.description.abstract | Introduction: Cachexia is a multifactorial syndrome characterized by the continuous loss of skeletal muscle mass that leads to progressive functional impairment. To date, no effective and approved drug intervention completely reverses the findings of cachectic syndrome. Studies have shown positive and encouraging effects of ghrelin (ghrelin - ghrl). In the body, exogenous ghrl is subject to very rapid degradation and current formulations are designed for parenteral administration. As a strategy to overcome these limitations, our study presents the intranasal release of ghrl carried by liposomes. Objectives: To develop a nanostructured liposomal system for the delivery of ghrl, designed with the necessary characteristics for naso-cerebral release. Methods: The liposomes were obtained by the hydration technique of phospholipid films, followed by extrusion or high-pressure homogenization, and coated with chitosan. Size, surface electrical potential, polydispersity and encapsulation efficiency were parameters used to characterize liposomes. Morphological characterization was performed by m (Cryo-TEM). The optimization of the formulation was performed using concepts from the Quality by Design (QbD) approach. The optimized selected formulations were subjected to ex vivo permeation and mucoadhesion analyzes. The size, polydispersity index and encapsulation efficiency of the selected optimized formulations were studied to evaluate the stability during the period of sixty days under refrigeration at 8 ± 1 ºC. Results: The optimized formulation of ghrl-carrying liposomes and coated with chitosan was identified through numerical optimization, establishing the target criteria of: size (minimum), polydispersion index (IPD) (minimum), zeta potential (maximum) and efficiency of encapsulation (EE) (maximum). The parameters selected for the optimization were 70 µg / mL of ghrelin concentration, 0.3% (m / m) of chitosan and coating time of 24 hours. The optimized formulation produced by homogenization (Lhomo) and the optimized formulation produced by extrusion (Lextru) were selected. The Lhomo formulation resulted in liposomes with 72.25 ± 1.46nm, IPD of 0.300 ± 0.027, zeta potential of 50.3 ± 1.46 and EE of 53.2%. While the Lextru formulation resulted in 152.43 ± 0.24nm, IPD of 0.159 ± 0.018, zeta potential of 60.81 ± 6.61 and EE of 53.6%. The analysis of the results showed that the evaluated parameters remained stable (p <0.5) for sixty days. The chitosan coating improved the performance of the formulations in ex vivo permeation and mucoadhesion analyzes, when compared to the uncoated formulations. Although high pressure homogenization results in lower liposomes than that obtained by extrusion, this parameter was not significant in permeation analyzes. Conclusion: With the phospholipid film rehydration method, followed by post-processing, it was possible to form a nanoliposome structure, confirmed by cryo-TEM. With the QbD approach it was possible to establish the process factors that influence the parameters of interest. Among the formulation factors that most influenced the particle size and surface charge, the concentration of chitosan was the most relevant. The concentration of ghrl inversely influences EE. The chitosan coating was important for the performance of the formulations in the ex vivo analysis of permeation and mucoadhesion. | eng |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.uniso.br/handle/uniso/956 | |
| dc.subject | Caquexia | |
| dc.subject | Química farmacêutica | |
| dc.subject | Medicamentos - Formas de dosagem | |
| dc.subject | Medicamentos - Administração | |
| dc.title | Desenvolvimento e avaliação de lipossomas como carreadores de grelina para liberação naso-cerebral | |
| dc.type | Dissertação | |
| dspace.entity.type | Publication | |
| local.rights | Open Access |
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