Navegando por Assunto "Ossos - Regeneração"
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- DissertaçãoDesenvolvimento e caracterização de scaffold com potencial para aplicação na regeneração de tecido ósseo(2015) Rebelo, Marcia de AraújoScaffolds são suportes tridimensionais porosos, temporários, usados para mimetizar a estrutura da matriz extracelular e estimular respostas celulares específicas em nível celular/molecular para regeneração de tecido orgânico. Os biomateriais que compõem os scaffolds conferem requisitos físico-químicos e arquitetônicos necessários para a estabilidade física, química e biológica da estrutura, resultando em uma estrutura com porosidade, resistência mecânica adequada e biocompatibilidade. O objetivo desse estudo foi desenvolver e avaliar as propriedades físico-químicas e biológicas (in vitro) dos scaffolds. Os scaffolds foram obtidos por liofilização das dispersões poliméricas aquosas de quitosana (Ch2), quitosana/alginato de sódio sem tratamento (ChNaAlg4), tratados com CaCl2 (Ch/NaAlg4B) e quitosana/alginato de sódio/hidroxiapatita (Ch/NaAlg4/Hap). Os scaffolds contendo hidroxiapatita foram preparados nas proporções 1:1:0,2, 1:1:0,4 e 1:1:0,6. A quitosana utilizada neste estudo apresentou grau de desacetilação de 81%. Todas as dispersões poliméricas apresentaram comportamento nãoNewtoniano (pseudoplástico) e propriedade tixotrópica. A porosidade, interconectividade e tamanho dos poros variou em função da composição dos scaffolds, ficou respectivamente entre 88-98%, 23,671-35,554 mm3 e 25-1425 µm. O scaffold Ch/NaAlg4B apresentou maior resistência a tração (4,47±0,9 kg/seg-1), flexibilidade (2,11±0,25 kg/seg-1) e elasticidade (1,78±0,01 kg/seg-1). O scaffold Ch2 apresentou maior resistência a perfuração (1,45±0,30 kg/seg-1). O perfil de intumescimento dos scaffolds variou em função do pH e da quantidade de eletrólitos contidos no fluído. A maior capacidade de intumescimento dos scaffolds em água, HCl (pH 4,4) e FSS (pH 6,80) foi, respectivamente, Ch/NaAlg4B, Ch/NaAlg4/Hap (1:1:0,4), Ch/NaAlg4/Hap (1:1:0,6) e Ch2. Em meio alcalino (pH 9,8) a capacidade de intumescimento dos scaffolds não apresentou diferença estatística (p>0,05). O teor de umidade após a liofilização dos scaffolds variou entre 8-11%. Os resultados da DSC indicam a formação de um novo compósito para os scaffolds contendo Hap. Os espectros FTIR apresentaram ausência do grupamento amino (1175 cm-1) nos scaffolds Ch/NaAlg4 e contendo Hap o que sugere a formação de um complexo ChNaAlg. Os ensaios de MTT, após 96 h, apresentaram proliferação celular entre 105-110% e células sem alterações morfológicas. O teste de bioatividade in vitro apresentou espessamento das paredes do scaffold Ch/NaAlg4/Hap (1:1:0,6) e redução da porosidade e interconectividade dos poros. Os scaffolds obtidos por liofilização das dispersões poliméricas de Ch2, Ch/NaAlg4, Ch/NaAlg4B e contendo Hap (Ch/NaAlg4/Hap), apresentaram estrutura com elevado grau de porosidade e interconectividade entre os poros. As propriedades mecânicas mostraram, simultaneamente, resistência à tração, perfuração, flexibilidade e elasticidade. O scaffolds testados induziram a proliferação celular e as células permaneceram sem alterações morfológicas. A análise dos resultados indicam que estes scaffolds podem ser uma alternativa promissora para a regeneração do tecido ósseo.
- DissertaçãoModelo experimental de osteotomia para inserção de Scaffold na prevenção de osteonecrose maxilo-mandibular in vivo(2017) Almeida, Adriana Duarte deOs scaffolds são arcabouços ou suportes de estruturas tridimensionais que desempenham um papel importante durante a regeneração dos tecidos. Os scaffolds permitem a penetração de células e nutrientes nos tecidos, bem como a fixação, migração, diferenciação, proliferação e crescimento das células, além da remoção de resíduos metabólicos. A osteonecrose dos maxilares induzida por bisfosfonatos é uma doença que apresenta lesão agressiva que pode evoluir rapidamente e resultar em sequelas funcionais, estéticas e psicológicas importante para os pacientes. Assim, este estudo objetiva avaliar a implantação de scaffolds a base de quitosana, hidroxiapatita e alginato de sódio na prevenção da osteonecrose maxilar induzida por bisfosfonato. O estudo experimental foi realizado com 48 ratos machos Wistar. Os animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos (n=24, de acordo com o tempo de eutanásia). Cada grupo foi dividido em quatro subgrupos (n=6): I - Controle (salina + exodontia); II – Ácido Zoledrônico (AZ) 0,6 mg/kg + exodontia; III – AZ + exodontia + scaffold quitosana/alginato de sódio/hidroxiapatita (Ch/NaAlg/Hap) 1:1:0,2; IV - AZ + exodontia + scaffold Ch/NaAlg/Hap 1:1:0,6. Após eutanásia (15 ou 30 dias após última administração de ácido zoledrônico), as maxilas foram avaliadas quanto às alterações alveolares e clínicas, por meio de exames radiográficos e histológicos. O sangue foi avaliado para parâmetros hematológicos e bioquímicos (funções hepática e renal, e cálcio), utilizando kits comerciais. Análise de variância de uma via (ANOVA) e teste de Chi-quadrado foram aplicados, e valores de p<0,05 foram considerados significantes. Na evolução de massa corpórea, não houve diferença estatística entre os subgrupos nos dois tempos de eutanásia, demostrando que a exodontia e a inserção dos scaffolds não interferiam no consumo de alimento. As imagens radiológicas não foram conclusivas. Entretanto, com a avaliação histopatológica, observou-se significativa osteonecrose no grupo tratado com AZ. A implantação dos scaffolds, apesar do processo inflamatório, da presença de colônias bacterianas e da osteomielite, conseguiu prevenir a osteonecrose. No tempo de eutanásia de 30 dias, em 50% dos animais do grupo scaffold 0,2 ocorreu osteogênese. Com relação à análise hematológica, no grupo com eutanásia de 15 dias, um aumento no número de hemácias e plaquetas foi observado no subgrupo II quando comparado ao outros subgrupos. A concentração da hemoglobina e do hematócrito diminuíram no subgrupo IV comparado ao grupo II. A atividade das transaminases hepáticas e de creatinina aumentaram significativamente no subgrupo II quando comparado ao controle. A concentração de cálcio aumentou no subgrupo IV comparado ao II. No grupo com eutanásia de 30 dias, nenhuma diferença entre os grupos foi observada para nenhum parâmetro. Concluiu-se que o AZ induziu osteonecrose no grupo que recebu apenas o medicamento. Os scaffolds (0,2 e 0,6) foram eficazes, pois foram capazes de prevenir este processo nos respectivos grupos. Todavia, os scaffolds não foram capazes de reduzir processo inflamatório e não apresentaram característica antimicrobiana. Por outro lado, os scaffolds se mostraram seguros quando se avalia a função hepática e renal. Alguns parâmetros hematológicos sofreram alterações pelos scaffold, as quais retornaram à normalidade com o tempo.