Repositório Institucional da UNISO
 

Atividade farmacológica de frações de diferentes polaridades de Casearia gossypiosperma Briquet contra o bloqueio neuromuscular induzido pelos venenos ofídicos (cascavel e jararacuçu)

dc.contributor.advisorOshima-Franco, Yoko
dc.contributor.authorSilva, Juliana de Oliveira Soares
dc.date.accessioned2023-05-09T20:54:29Z
dc.date.available2023-05-09T20:54:29Z
dc.date.issued2012
dc.description.abstractEstudos prévios mostraram que o extrato seco de folhas de Casearia gossypiosperma Briquet (C. gossypiosperma), popularmente conhecida como paude-espeto, impediu o bloqueio neuromuscular induzido pelo veneno de Bothrops jararacussu (B. jararacussu), agregando valor medicinal à espécie. Os objetivos desta pesquisa foram testar o extrato liofilizado de C. gossypiosperma contra o veneno bruto de Crotalus durissus terrificus (C. d. terrificus) e fracionar o extrato seco a fim de isolar/identificar compostos das frações ativas contra os venenos ofídicos de cascavel e jararacuçu (estudo biomonitorado). Para tanto, foi obtido um extrato seco das folhas desta espécie que, em seguida, foi fracionado por partição líquido-líquido utilizando-se solventes de diferentes polaridades (hexano, FHEX; diclorometano, FDM; acetato de etila, FAET; e metanol, FMET). Métodos cromatográficos (em coluna, CC; em camada delgada comparativa, CCDC; e em camada delgada preparativa; CCDP) foram empregados até a obtenção de compostos puros, que foram submetidos à técnica de ressonância magnética nuclear de hidrogênio (RMN 1H) e carbono (RMN 13C). O extrato liofilizado (50 µg/mL) não impediu o efeito neurobloqueador do veneno de C. d. terrificus (10 µg/mL, n=10), diferentemente da fração hexânica liofilizada, que protegeu parcialmente contra a paralisia induzida pelo veneno de C. d. terrificus (10 µg/mL; 48,3 ± 10,8%, n=10), no tempo de 120 minutos (p<0,05). Já as demais frações liofilizadas FDM, FAET e FMET (25 µg/mL, cada), não demonstraram efeito protetor estatisticamente significativo contra o veneno (p>0,05). Nos ensaios farmacológicos para a neutralização do veneno de B. jararacussu (40 µg/mL), ficou evidenciada a proteção da fração hexânica liofilizada (10 µg/mL) no tempo de 120 minutos, em 94,8 ± 2,6% (n=5), assim como as demais frações liofilizadas FDM, FAET e FMET, que demonstraram proteções significativas (p<0,05), em 60,9 ± 8,7% (n=6), 44,7 ± 9,1% (n=7) e 38,6 ± 5,0% (n=5), respectivamente, aos 120 minutos. Em virtude de a fração hexânica ter sido a que demonstrou melhor atividade contra os venenos estudados, esta foi subfracionada por cromatografias em coluna e em camada delgada preparativa. Dentre as subfrações obtidas neste processo, duas foram submetidas à espectrometria de RMN 1H, sendo uma delas caracterizada como uma mistura de terpenos e a outra, mais purificada, submetida para a obtenção de espectros de ressonância magnética nuclear (RMN) bidimensionais, mas cuja massa não foi suficiente para a elucidação da estrutura química. Avaliando os resultados em conjunto é possível concluir que a fração hexânica foi a principal responsável em proteger contra o bloqueio neuromuscular induzido por ambos os venenos ofídicos estudados.por
dc.description.abstractPrevious studies showed that the dried extract of leaves of Casearia gossypiosperma Briquet (C. gossypiosperma), popularly known as “pau-de-espeto”, prevented the neuromuscular blockade induced by Bothrops jararacussu venom (B. jararacussu), attributing a pharmacological activity to the species. The objectives were to test the lyophilized extract of C. gossypiosmerma against the gross venom of Crotalus durissus terrificus (C. d. terrificus) and fractionate the dried extract to isolate/identify compounds of the active fractions against the venoms of “cascavel” and “jararacuçu” (bioassay studies). To that end, a dried extract was obtained from the leaves of this species. It was then fractionated by liquid-liquid partition using solvents of different polarities (hexane, FHEX; dichloromethane, FDM; ethyl acetate, FAET; and methanol, FMET). Chromatographic methods (column, CC; comparative thin layer, CTL; and preparative thin layer, PTL) were used to obtain pure compounds, which underwent the technique of hydrogen nuclear magnetic resonance (1H NMR) and carbon (13C NMR). Lyophilized extract (50 µg/mL) did not prevent the neuroblocking effect of the venom of C. d. terrificus (10 µg/mL, n=10), differently from the lyophilized hexane fraction, which partially protected against the paralysis induced by the C. d. terrificus venom (10 µg/mL; 48.3 ± 10.8%, n=10), in time of 120 minutes (p<0.05). The other lyophilized fractions FDM, FAET and FMET (25 µg/mL each), showed no protective action, statistically meaningful, against the venom (p> 0.05). In the pharmacological tests for the neutralization of B. jararacussu venom (40 µg/mL), it was emphasized the protection of the lyophilized hexane fraction (10 µg/mL) in the time of 120 minutes, at 94.8 ± 2.6% (n = 5), serving as a protection against blockade induced by the venom at the neuromuscular junction; as well as the other lyophilized fractions FDM, FAET and FMET demonstrated meaningful protections (p <0.05), but partial, at 60.9 ± 8.7% (n = 6), 44.7 ± 9.1% (n = 7) and 38.6 ± 5.0% (n = 5), respectively, in 120 minutes. As the hexane fraction demonstrated the best activity against the venoms studied, it was subfractioned by column chromatography and preparative thin layer. Among the subfractions obtained in this process, two were subjected to 1H NMR spectroscopy; one of which was characterized as a mixture of terpenes and the other one, more purified, was submitted to two-dimensional nuclear magnetic resonance (NMR), but the mass was not sufficient to elucidate the chemical structure. Evaluating the results together, it is possible to conclude that the hexane fraction was the mainly responsible for protecting against the neuromuscular blockade induced by both snake venoms studied.eng
dc.identifier.urihttps://repositorio.uniso.br/handle/uniso/548
dc.subjectPlantas medicinais
dc.subjectFitoquímicos
dc.subjectNeurofarmacologia
dc.subjectCobra venenosa - Veneno
dc.titleAtividade farmacológica de frações de diferentes polaridades de Casearia gossypiosperma Briquet contra o bloqueio neuromuscular induzido pelos venenos ofídicos (cascavel e jararacuçu)
dc.typeDissertação
dspace.entity.typePublication
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