Dissertações e Teses

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Isolamento, caracterização e estabilização em micropartículas de bacteriófagos para Salmonella enterica: potencial para biocontrole em aves de granja
(2024) Pereira, Arthur Oliveira
A Salmonella é conhecida um dos patógenos de maior prevalência nas infecções alimentares. O aparecimento de cepas de Salmonellas com resistência a múltiplos antimicrobianos já foi descrito em humanos, alimentos e em animais. O abuso de antimicrobianos prescritos na medicina humana e animal tem facilitado a seleção destes agentes. A produção avícola é um dos setores que mais utiliza antibióticos e, reduzir o uso destas substâncias é um dos maiores desafios. Neste sentido, abordagens alternativas são importantes, como o uso de bacteriófagos. Nesta pesquisa, objetivou-se o isolamento, a caraterização de bacteriófagos líticos contra Salmonella enterica e a microencapsulação dos fagos em um Invólucro Microcapsular Biopolimérico Comestível (EBMW), visando a estabilização estrutural e funcional dos fagos para potencial aplicação na alimentação de aves de granja. Foram isolados, propagados, purificados e caracterizados fagos líticos contra Salmonella enterica. A caracterização incluiu varredura espectral em UV-Vis; determinação dos coeficientes de extinção molar; análises das proteínas estruturais por SDS- PAGE (eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecilsulfato de sódio); caracterização morfológica por microscopia eletrônica de transmissão (MET); avaliação da gama de hospedeiros; determinação da eficiência de plaqueamento (EOP); curvas de um só ciclo de crescimento síncrono (OSGC); curvas de adsorção; curvas de morte; e fatores abióticos. Na sequência foram desenvolvidas e avaliadas micropartículas de alginato de sódio revestidas de quitosana. As partículas formadas foram caracterizadas por microscopia eletrônica de varredura (MEV); tomografia por transmissão de raios-X (XRT); espectrofotometria de infravermelho (FTIR); calorimetria diferencial de varredura (DSC); espectrofotometria de fluorescência de raios-X (XRF); determinação da viabilidade lítica dos fagos; e ensaios exvivo no intestino de aves. Os fagos isolados pertencentes à classe Caudoviricetes mostraramse eficazes contra S. enterica. As micropartículas mostraram-se adequadas para o uso pretendido sendo capazes de estabilizar o coquetel de fagos, com resultados promissores para a veiculação de fagos para combate de salmonelose em aves de granjas.
Antibióticos e reação medicamentosa com eosinofilia e sintoma sistêmico: análise dos registros brasileiros de farmacovigilância
(2024) Camargo, Marcelo Bueno de
Antibióticos podem desencadear um evento adverso raro conhecida como reação medicamentosa com eosinofilia e sintoma sistêmico (do inglês Drug Reations with Eosinophilia and Systemic Symptoms - DRESS). Trata-se de um quadro grave caracterizado pela presença de eosinofilia e erupção cutânea aguda que pode evoluir a óbito ou deixar sequelas importantes na ausência de um diagnóstico precoce. A partir de 2020, a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa) disponibilizou um sistema de notificação de eventos adversos aos medicamentos, conhecido como VigiMed. Este estudo investigou a associação entre as notificações de DRESS e o uso de antibióticos por meio do acesso ao banco de dados de farmacovigilância da Anvisa. Trata-se de uma análise das notificações de eventos adversos registradas no VigiMed entre 1 de dezembro de 2018 e 31 de dezembro de 2022. Foi usado o Dicionário Médico para Atividades Regulatórias (do inglês Medical Dictionary for Regutatory Activites - MedDRA) para identificar casos de DRESS; o sistema de classificação Anatomical Therapeutic Chemical (ATC) para distinguir as notificações com antibióticos; e os nomes da Denominação Comum Internacional (DCI) para diferenciar alguns antibióticos selecionados. As variáveis foram incluídas no modelo de regressão logística multivariada e o Reporting Odds Ratio (ROR) com os respectivos intervalos de confiança de 95% (IC 95%) foi a medida de associação utilizada. Foram consideradas 160.101 notificações de eventos adversos aos medicamentos, com 136 casos suspeitos de DRESS. Quando comparada com outras classes de medicamentos, a frequência da suspeita de DRESS foi estatisticamente significativa em relação ao uso de qualquer antibiótico (ROR: 4,8; IC 95%: 3,3-7,0), meropenem (ROR: 13,0; IC 95%: 8,0-21,0), vancomicina (ROR: 11,5; IC 95%: 7,4-17,6), ampicilina (ROR: 6,8; IC 95%: 2,1-21,8), amoxicilina (ROR: 4,7; IC 95%: 1,5-15,0), cefepima (ROR: 4,3; IC 95%: 1,3-13,6), piperacilina+tazobactam (ROR: 2,5; IC 95%: 1,1-5,8) e ceftriaxona (ROR: 2,4; IC 95%: 1,1-5,1). Não foi encontrada significância estatística entre DRESS e o uso de oxacilina (ROR: 2,7; IC 95%: 0,7-11,1). Observou-se associação entre notificação de DRESS e o uso de antibióticos, com destaque especial para aqueles de uso rotineiro no contexto hospitalar. Embora haja um risco potencial de subnotificações ou de causalidade não atribuída, as informações geradas são úteis para análises de reações adversas raras. Dada a gravidade dos achados, novos estudos realizados por parte das agências reguladoras, permitirão coleta de informações mais precisas sobre esta reação adversa.
Avaliação do cogumelo Agaricus bisporus como um agente protetor contra os efeitos tóxicos do chumbo na exposição materna
(2023) Caetano, Erika Leão Ajala
Chumbo (Pb) é um contaminante ambiental nocivo capaz de impactar vários tecidos dentro do corpo humano. O uso de recursos naturais, como cogumelos medicinais, mostra-se promissor para diminuir os efeitos nocivos do Pb. Com isso em mente, nossa investigação centrou-se no potencial do Agaricus Bisporus, um tipo de cogumelo, para neutralizar as consequências tóxicas da exposição ao Pb por meio de experimentos envolvendo ratos e nematoides. Em nossos ensaios, submetemos os animais a doses combinadas de Agaricus Bisporus (Ab) por e Pb. Esta dupla exposição foi explorada em dois modelos in vivo separados: ratas grávidas e C. elegans. No caso de ratas grávidas, as ratas Wistar foram divididas em quatro grupos distintos (n = 5/grupo): Grupo I - Controle; Grupo II – Ab 100 mg/kg; Grupo III – Pb 100 mg/L; Grupo IV – Ab+Pb - 100 mg/kg + 100 mg/L. Este regime de exposição persistiu até o 19º dia de gestação, quando as ratas prenhes foram eutanasiadas. Avaliamos uma série de resultados, incluindo ganho de peso, toxicocinética, características hematológicas, marcadores bioquímicos, indicadores de estresse oxidativo, bem como capacidade reprodutiva e desenvolvimento embriofetal. Notavelmente, a coadministração desses cogumelos desempenhou um papel significativo no alívio dos impactos nocivos da exposição ao Pb e na promoção da recuperação. Notavelmente, Agaricus Bisporus exibiu propriedades antioxidantes, levando a melhorias nos parâmetros de estresse oxidativo. Além disso, o cogumelo exibiu uma capacidade parcial de reverter os danos à morfologia fetal e aos atributos ósseos. Em nossa investigação envolvendo C. elegans, fizemos observações dignas de nota. A co-exposição ao Pb juntamente com 100 mg/mL de Agaricus Bisporus demonstrou redução na mortalidade embrionária e larval. Essa combinação também levou ao aumento do tamanho e da motilidade da ninhada em comparação com os nematóides expostos apenas ao Pb. Além disso, observamos a mitigação da transmissão de toxicidade reprodutiva dos pais do nematoide para seus descendentes. Com base nessas descobertas, propomos que os atributos antioxidantes de Agaricus Bisporus têm o potencial de mitigar as consequências desfavoráveis da toxicidade reprodutiva induzida por Pb. Consequentemente, este antioxidante natural pode servir como uma contramedida valiosa contra o impacto prejudicial do Pb na saúde reprodutiva.
Frequência de eventos adversos nas mulheres com HIV/AIDS em terapia antirretroviral: uma revisão sistemática e metanálise
(2022) Oliveira, Jardel Corrêa de
Antecedentes: A terapia antirretroviral (TARV) é recomendada para todas as pessoas com HIV/Aids e como qualquer tratamento de uso crônico, apresenta efeitos adversos. Pouco se sabe sobre esses efeitos em mulheres vivendo com HIV/AIDS. Objetivo: Determinar a incidência de eventos adversos em mulheres com HIV/AIDS em terapia antirretroviral. Métodos: Revisão sistemática que incluiu ensaios clínicos controlados e randomizados que avaliaram eventos adversos em mulheres em uso de qualquer TARV, com pelo menos 12 semana de seguimento. Desfechos foram o número de mulheres com eventos adversos clínicos e/ou laboratoriais relacionado ou não a TARV, descontinuação do tratamento, eventos adversos graves (grau 3 e/ou 4) e sérios, eventos adversos sobre o aparelho reprodutor feminino e a saúde óssea e o número de morte por todas as causas e relacionadas à TARV. Foram excluídos estudos de profilaxia pré e pós-exposição ao HIV, de mulheres grávidas ou amamentando, de coinfecção com tuberculose, hepatite B ou C, análises post hoc, extensões abertas sem comparador, e com TARV ou doses não utilizadas na prática clínica. Não houve limitação ao status de publicação, período de condução do estudo e idioma. A busca se deu no Medline, Embase, Cochrane Library, Epistemonikos, Lilacs, Who Index e em portais de registros de ensaios clínicos. A equipe selecionou, em pares e de forma independente, todas as citações, resumos e artigos de texto completo; conflitos foram resolvidos por consenso ou por um terceiro revisor. Para o risco de viés utilizou-se a ferramenta RoB2 da Cochrane. Estimou-se a taxa de incidência de eventos por 1000 pessoas-ano, ajustada por tempo e perda de seguimento. Resultados: Foram identificados 21.238 estudos para triagem, dos quais 10 (n=4.716 pessoas; 2.871 mulheres) atenderam ao critério de elegibilidade. Sete estudos incluíram apenas mulheres. A maioria (80%) não teve cegamento. Quatro tiveram uma quantidade de perdas de seguimento que poderiam interferir nos seus resultados. Seis eram da indústria farmacêutica e três tiveram financiamento misto. Nove tiveram alto risco de viés. A descontinuação do tratamento por qualquer evento adverso variou entre diferentes esquemas ARV, sendo que a análise combinada de todos as TARV mostrou uma taxa de incidência média de descontinuação do tratamento de 20,78 eventos por 1000 pessoas-ano (ICr 95% 5,58-57,31). A descontinuação por eventos adversos relacionados a TARV de todos os tratamentos agregados ocorreu em uma média de 4,31 por 1000 pessoas-ano (ICr 95% 0,13-54,72). Nenhum dos estudos avaliou eventos adversos no sistema reprodutor feminino. Apenas um estudo analisou a ocorrência de osteoporose. Conclusão: A escassez de informações sobre eventos adversos da TARV especificamente em mulheres, aliado ao alto risco de viés da quase totalidade dos estudos existentes, grande parte deles com participação da indústria farmacêutica, não permite que se estabeleçam conclusões sobre esquemas preferenciais para uso em mulheres com HIV/Aids. Novos estudos são necessários, com desenho metodológico e qualidade científica adequados para avaliar os eventos adversos da TARV em mulheres, de maneira a subsidiar uma abordagem centrada nas pessoas, capaz de manejar oportunamente tais eventos adversos e garantir ao máximo a adesão ao tratamento.
Atividade de amoxicilina, dexametasona e nimesulida como agentes profiláticos em cirurgias de implantes orais
(2014) Gimenez, Patricia Spada
O objetivo deste estudo foi avaliar efetividade do uso de antibiótico profilático, além de avaliar a atividade analgésica de anti-inflamatórios esteroidais (dexametasona) e não esteroidais (nimesulida) em cirurgias de implantes orais. Foram selecionados 135 pacientes, que se apresentaram para atendimento em uma clínica odontológica, com a necessidade de serem submetidos à colocação de implantes orais. Após os critérios de inclusão/exclusão permaneceram no estudo 108 pacientes que foram divididos em 4 grupos, onde 4 protocolos de medicação pré e pós-operatória foram implementados. Grupo 1 foi prescrito 2g de amoxicilina e 8mg de dexametasona 1h antes do procedimento cirúrgico e 500mg amoxicilina a cada 8h durante 3 dias. Grupo 2 foi prescrito 8mg de dexamtasona 1h antes da cirurgia. Grupo 3 recebeu 2g de amoxicilina e 100mg de nimesulida 1h antes da cirurgia e ainda, amoxicilina (500mg) a cada 8h durante 3 dias, nimesulida de 12 em 12h durante 3 dias. Grupo 4 foi prescrito 100 mg de nimesulida 1h antes da cirurgia e no pós-operatório 100mg de nimesulida a cada 12h durante 3 dias. Os resultados foram avaliados por análise de variância. Não foram observadas diferenças significativas entre os grupos testados. Comparando os resultados dos grupos que usaram antibióticos e os que não usaram, não houve diferença estatistica entre os resultados (presença ou não de infecção). Para a atividade analgésica, também não houve diferença estatística entre os resultados dos grupos que usaram dexametasona e dos grupos que usaram nimesulida. A nimesulida e a dexametosona mostraram atividades analgésicas semelhantes e o uso de amoxicilina como agente profilático mostrou-se desnecessário.
Prescrição de medicamentos por enfermeiros e farmacêuticos: overview de revisões sistemáticas
(2017) Franquez, Reginaldo Tavares
A prescrição de medicamentos por profissionais não médicos foi realizada pela primeira vez no Reino Unido em 1986, onde hoje, enfermeiros, farmacêuticos e outros profissionais da saúde podem prescrever medicamentos dentro de suas esferas de competência. Desde então, a prescrição por enfermeiros e farmacêuticos tem evoluído de forma variada, em diferentes países. Embora os pacientes sejam receptivos à prescrição por profissionais não médicos, ainda há escassez de evidências em relação aos resultados clínicos. Nesse contexto, o objetivo desse estudo foi sumarizar as evidências sobre a prescrição de medicamentos por enfermeiros e farmacêuticos. Tratase de um overview de revisões sistemáticas. A busca e a seleção de revisões sistemáticas sobre a prescrição de medicamentos por enfermeiros e farmacêuticos exploraram as bases de dados MEDLINE, via PubMed, Biblioteca Cochrane, CINAHL, Web of Science e OpenGrey, combinando os descritores nurses, pharmacists, prescriptions e seus sinônimos remissivos, até Maio de 2016. Foram incluídas no estudo revisões sistemáticas que abordaram a prescrição de medicamentos por enfermeiros ou farmacêuticos em qualquer nível de atenção, sem restrição quanto ao desenho dos estudos primários, data de publicação ou idioma. Para avaliação da qualidade metodológica das revisões sistemáticas selecionadas foi utilizado o instrumento Assessing the Methodological Quality of Systematic Reviews (AMSTAR). Os principais achados foram agrupados em categorias temáticas, definidas com base em análise de conteúdo, e discutidas qualitativamente na forma de síntese narrativa. Nove revisões sistemáticas foram incluídas no estudo. Os artigos selecionados foram publicados entre 2002 e 2016 e o número de estudos primários incluídos nas revisões sistemáticas variou entre 7 e 124. Seis revisões sistemáticas abordaram exclusivamente a prescrição de medicamentos por enfermeiros; uma abordou a prescrição de medicamentos por enfermeiros e farmacêuticos; e duas abordaram profissionais não médicos. Foram identificados estudos avaliando os efeitos da prescrição por enfermeiros; comparando a prescrição por enfermeiros ou médicos na atenção primária; comparando os cuidados iniciais fornecidos por enfermeiros e médicos; avaliando a prescrição de antimicrobianos por enfermeiros prescritores independentes; avaliando as interações entre clínicos não médicos (incluindo farmacêuticos e enfermeiros) e a indústria; revisando métodos educacionais capazes de melhorar a prescrição tanto de profissionais médicos quanto não médicos. Na avaliação da qualidade metodológica segundo os critérios do AMSTAR predominaram revisões sistemáticas de qualidade baixa ou moderada. Os principais desfechos avaliados foram agrupados em seis categorias temáticas: categorias profissionais e nível de atenção; tempo de consulta e qualidade do atendimento; aceitabilidade e nível de satisfação dos pacientes; acesso a medicamentos e serviços; aspectos econômicos e barreiras à implantação. As revisões sistemáticas incluídas nesse overview apontaram benefícios potenciais da prescrição de medicamentos por enfermeiros e farmacêuticos. No entanto, deficiências metodológicas dos estudos não permitiram conclusões definitivas sobre o tema. Além disso, foram identificadas lacunas na base de conhecimentos que resultaram na indicação de temas relevantes para pesquisas futuras, a serem conduzidas com maior rigor metodológico.
Estabilização estrutural e funcional de sericina em filme biopolissacarídico: bio-origami para a regeneração de pele
(2018) Rocha, Liliam Katsue Harada
Hidrogéis são estruturas formadas por redes tridimensionais de polímeros hidrofílicos reticulados, intumescendo em contato com água mas mantendo sua integridade estrutural. Os hidrogéis biopoliméricos são bastante interessantes para utilização em regeneração de pele e no tratamento de feridas cutâneas, como curativos, devido a muitos fatores, incluindo a sua baixa toxicidade. Na preparação de hidrogéis, utilizam-se polímeros tanto naturais como sintéticos, polimerizados por diferentes processos. Neste projeto de pesquisa, optouse pela utilização dos biopolissacarídeos goma xantana e carragenana, além da utilização da proteína sericina, que foi incorporada nos filmes como princípio ativo. A sericina é uma proteína globular bioativa, constituindo entre 25-30% (m/m) das proteínas da seda. Devido às suas propriedades bioquímicas e biofísicas exclusivas, a sericina tem sido estudada para várias potenciais aplicações. Este trabalho de pesquisa teve como objetivo desenvolver e avaliar um filme biopolimérico integrando sericina (bio-origami), com propriedades mecânicas adequadas, com potencial de regeneração cutânea. A sericina, extraída do casulo do bicho da seda (Bombyx mori) por dois processos distintos, foi comparada ao seu padrão e caracterizada por diferentes métodos, tanto do ponto de vista físicoquímico como biológico. Seguindo-se à caracterização da sericina, produziram-se os filmes biopoliméricos (bio-origamis) para estabilização estrutural e funcional de sericina, com recurso a um planejamento fatorial completo do tipo 32 (2 variáveis (% (m/m) de goma xantana e % (m/m) de carragenana) em 3 níveis ((-1), (0) e (+1)), com polimerização realizada por adição de álcool polivinílico (PVA) (98% hidrolizado) a 1,25% (m/v), e com adição de glicerol até 2,50% (m/v) em todas elas, para indução de efeito plastificante nas formulações, originando assim um total de 09 formulações. Para a matriz de filme biopolimérico otimizado estatisticamente, a incorporação de sericina foi avaliada na formulação ótima em termos de composição biopolissacarídica, nos níveis de 0, 1, 2, 5, 10, 20 e 50 mgsericina/mLhidrogel. Os filmes bioorigami obtidos foram avaliados considerando a capacidade de liberação da entidade proteica bioativa (sericina), através de testes de permeação, assim como por testes de caracterização tanto físicoquímica como biológica. As duas técnicas de extração utilizadas para a produção dos extratos da proteína sericina apresentaram rendimentos relativamente semelhantes. No processo de caracterização biológica, os extratos de sericina apresentaram-se atóxicos e com atividade antimicrobiana positiva para cepas de Staphylococcus aureus. Na análise de atividade antioxidante, a sericina obtida pela técnica de extração por liofilização apresentou maior atividade antioxidante. A composição matricial do filme biopolimérico de escolha obtido pela otimização estatística foi aquela correspondendo ao nível (+1) (0), por resultar em um filme mais forte e elástico. Os resultados obtidos a partir da caracterização do filme bio-origami otimizado, integrando diferentes concentrações de sericina, evidenciam que a proteína sericina foi estabilizada tanto estruturalmente como funcionalmente, com o bio-origami dotado de efeitos de eliminação de radicais livres e capacidade de liberação prolongada da proteína bioativa, sugerindo assim uma potencial aplicação biofarmacêutica para a regeneração de pele.
Uso dos domínios IMMPACT em ensaios clínicos de acupuntura para dor crônica: uma pesquisa metodológica
(2018) Mazzei, Lauren Giustti
Introdução: A dor é uma queixa comum e debilitante, que afeta relações com amigos e familiares, a força de trabalho e sociabilidade dos indivíduos. A acupuntura é um dos recursos terapêuticos utilizados para o manejo da dor crônica. Variabilidade nas aferições de desfechos em ensaios clínicos randomizados sobre dor crônica não oncológica geram inconsistências na determinação dos efeitos dos tratamentos. Diante de tais conflitos, a Initiative on Methods, Measurement, and Pain Assessment in Clinical Trials (IMMPACT) recomenda quatro domínios fundamentais a serem abordados nas avaliações dos tratamentos para a dor crônica: dor, função física, estado emocional e percepção de melhora do paciente. Objetivos: Avaliar a adesão às recomendações IMMPACT na mensuração dos desfechos da dor crônica não oncológica em ensaios clínicos randomizados sobre acupuntura. Métodos: Trata-se de pesquisa metodológica na qual foi realizada busca sistemática por estudos elegíveis em diversas fontes de informação. Estudos elegíveis incluíram aqueles que randomizaram e alocaram pacientes com dor crônica não oncológica para serem tratados com acupuntura e controle com acupuntura “sham” ou não acupuntura, e com número de pacientes igual ou superior a 100. Seis revisores, de forma independente e em duplicata, fizeram a triagem dos títulos e resumos e a revisão do texto completo para determinar a elegibilidade e subsequentemente realizaram a extração dos dados e avaliação do risco de viés. Foram extraídos a presença dos quatro domínios de desfechos recomendados, a fonte de obtenção das informações do desfecho dor e as ferramentas utilizadas para medir tais domínios. Os dados foram analisados por meio de regressão logística e metanálises, onde calculou-se a diferença de médias padronizadas a partir da técnica de DerSimonian e Laird para modelos aleatórios. Resultados: De 2.182 estudos encontrados, 24 foram incluídos. Onze estudos apresentaram baixo risco de viés. A dor foi mensurada em 23 estudos, a função física em 22 estudos, o estado emocional em 14 estudos e a percepção de melhora do paciente em um estudo. No desfecho dor, o paciente foi a fonte de obtenção da informação em 50% dos estudos. Os instrumentos de mensuração recomendados pela IMMPACT foram utilizados em oito estudos (35%) que avaliaram dor, um estudo que avaliou o estado emocional (7%), e um estudo que avaliou a percepção de melhora e satisfação do paciente. Ano de publicação, país de origem, fator de impacto dos periódicos e qualidade metodológica dos estudos não apresentaram associação estatisticamente significante com a adesão aos domínios recomendados pela IMMPACT. Conclusão: Ensaios clínicos randomizados que utilizaram a acupuntura no manejo da dor crônica falharam em aderir às recomendações IMMPACT. Sociedades clínicas e a IMMPACT não compartilham as mesmas recomendações e isso reflete na diversidade dos desfechos e instrumentos adotados nos estudos, dificultando a comparação dos resultados.
Caracterização de extrato antocianínico obtido a partir dos frutos da jussara (Euterpe edulis Martius) e incorporação em barras de cereais
(2017) Favaro, Laura Isabella Lopes
Introdução: A palmeira Jussara (Euterpe edulis Martius), originária da Mata Atlântica, produz frutos ricos em antocianinas. Na indústria de alimentos, as antocianinas são empregadas como corantes naturais e apresentam elevada capacidade antioxidante, com comprovados efeitos benéficos para a saúde. As barras de cereais representam uma alternativa de complemento alimentar à base de carboidratos, proteínas e fibras. Assim acrescentar antocianina em barras de cereais pode oferecer novas oportunidades de mercado visando atender a crescente preocupação da população por uma alimentação saudável. Objetivo: Produzir e caracterizar um extrato antocianínico obtido a partir dos frutos da Jussara e avaliar sua incorporação em barras de cereais à base de avria e realizar testes sensoriais e compra. Material e Métodos: Para obtenção do extrato foi usado solução hidroalcoólica (1:1 fruta:solvente) (30 min/55 ºC), filtragem e secagem (100 °C/6 h). Para a caracterização do extrato foram determinados: teor de antocianinas pelo método do pH diferencial; atividade antioxidante pelo método do complexo fosfomolibdênio e por captura do radical livre DPPH; atividade antimicrobiana pelo método disco-difusão; calorimetria diferencial de varredura; espectroscopia de infravermelho com Transformada de Fourier; difração de raios-X; teor fenólico total pelo método de Folin-Ciocalteu e presença de açúcares por cromatografia em camada fina. Também foram utilizadas tomografia computadorizada por transmissão de raios-X e fluorescência de raios-X na caracterização dos frutos. Para a produção das barras de cereais foram empregadas quatro formulações com concentrações diferentes de extrato antocianínico (0; 0,25; 1,0; 2,0 % (m/m)). Os testes sensoriais realizados foram: teste afetivo de aceitabilidade para os atributos aparência, aroma, textura, sabor, impressão global do produto e intenção de compra. Resultados e Discussão: O processo de obtenção do extrato apresentou-se simples e de baixo custo. O teor de antocianina total foi de 17,64 ± 1,13 mg/100 g fruta fresca e apresentou boa capacidade antioxidante. O teor fenólico total foi de 1,958 ± 0,070 mg de ácido gálico/ g de extrato. O espectro de infravermelho indicou bandas semelhantes ao corante antocianina. Pelo espectro de difração de raios-X observou-se domínio da forma amorfa. Comprovou-se ainda a presença de rutina e quercetina, glicose e sacarose. O extrato antocianínico apresentou grande quantidade de cloreto, potássio e cálcio, e traços de enxofre, ferro, fósforo, manganês, zinco e rubídio. O extrato apresentou ligeira capacidade antimicrobiana contra Staphylococcus aureus. O teste sensorial realizado nas barras de cereais indicou que as diferentes concentrações de extrato antocianínico não tiveram influência significativa nos atributos avaliados (p>0,05). Houve diferença significativa na intenção de compra (p<0,05), sendo que a formulação L07 com (1,0 %(m/m) de extrato antocianínico) apresentou a menor intenção de compra. Conclusão: A barra de cereal desenvolvida contendo 2,0 % (m/m) de extrato antocianínico foi a considerada a mais adequada para comercialização. A barra de cereal obtida pode ser considerada um alimento com características funcionais e permite o aproveitamento de uma espécie vegetal nativa brasileira em vias de extinção.
Estudo da composição química elementar de extratos secos de plantas medicinais e plantas medicinais moídas pela técnica de fluorescência de raios-x
(2019) Estanagel, Thais Hora Paulino
Extratos de plantas medicinais são usados em diferentes tipos de produtos em diferentes áreas, como a farmacêutica, cosmética, alimentícia e veterinária. O metabolismo do corpo humano é regulado pela presença ou ausência de certos elementos químicos, alguns destes são responsáveis por funções celulares vitais para o ser humano como o potássio, o ferro e o cálcio. Outros elementos como metais pesados (As, Hg, Cd e Pb) mesmo em concentrações muito baixas são altamente tóxicos. Portanto, há necessidade de se investigar a composição química de plantas e extratos medicinais, pois a presença em concentrações excessivas de alguns elementos, assim como a deficiência de outros, pode levar a uma série de distúrbios metabólicos. O metabolismo das plantas, o tipo de solo e os métodos de obtenção dos extratos podem influenciar na composição fitoquímica dos extratos. Com isso em mente, é necessário investigar a composição dos elementos químicos desses extratos com a finalidade de detectar a presença de contaminantes nocivos à saúde ou acima dos níveis estabelecidos pelos órgãos reguladores. Principalmente investigar a contaminação por metais pesados como As, Pb, Hg e Cd. O objetivo deste trabalho foi avaliar a composição química de plantas moídas e extratos secos de plantas medicinais utilizando a técnica de Fluorescência de Raios-X por Dispersão de Energia (ED-XRF). A metodologia utilizada está baseada na seleção de 20 amostras, que foram prensadas com uma força de equivalente a 15 toneladas usando máquina de compressão para formarem pastilhas. Pastilhas com concentrações conhecidas dos elementos químicos de interesse foram usadas para calibrar o sistema de ED-XRF. As análises qualitativas e quantitativas dos extratos secos e plantas medicinais moídas foram feitas no Laboratório de Física Nuclear Aplicada da Universidade de Sorocaba – Uniso e indicaram a presença dos seguintes elementos: As, Cr, Cu, Fe, Ni, Zn, Si, P, S, Cl, K, Ca, Ti, V, Mn, Co, Rb, Zr, Cd, Sn, Ba, Hg, Pb, Bi, Mo e Pt. O que confirma a nossa hipótese sobre a necessidade de avaliar estes e outros produtos para consumo humano.
Avaliação da tintura da inflorescência da bananeira (Musa spp) na desnaturação das proteínas formadoras do glúten
(2019) Culik, Maria Aparecida
O trigo faz parte da alimentação humana; no entanto, suas proteínas não são totalmente digeridas por algumas pessoas, causando grandes desconfortos e a única forma de prevenir esses efeitos é sua total exclusão da alimentação. Uma tintura-mãe produzida com a inflorescência da bananeira (Musa spp) vem dando resultados em pessoas diagnosticadas e em outras que apresentam sintomas de sensibilidade ao glúten. Desta forma, o objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial desta tintura-mãe, na desnaturação das proteínas formadoras do glúten. A tintura-mãe foi produzida, seguindo protocolo da Farmacopeia Homeopática Brasileira. Foram realizados experimentos com a farinha de trigo em contato com solução de cloreto de sódio à 5%, tintura-mãe e etanol obtido de cereais. Essas amostras, juntamente com amostras de pão + tintura-mãe, foram avaliadas quanto aos seus grupamentos químicos por Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR). Para quantificação de gliadina e de glúten total, o kit comercial ELISA-R5 (Ridascreen Gliadin) foi utilizado. Por fim, a atividade antioxidante da tintura-mãe recém preparada e após 30 dias de armazenamento também foi avaliada através do método DPPH. A tintura-mãe produzida com a inflorescência da bananeira mostrou-se eficiente clivando o glúten quando colocada em contato com a farinha de trigo e com alimentos (pão) contendo glúten. Os espectros de FTIR mostraram a ação da tintura-mãe, clivando as moléculas do glúten, enquanto as análises com o ELISA confirmaram os resultados. A tintura-mãe mostrou capacidade antioxidante de 59% no pós-preparo, mas decaiu para 34% aos 30 dias. Embora existam alguns medicamentos em fase de estudo pré-clínicos, a literatura cientifica não relaciona o uso da bananeira na desnaturação do glúten. Neste contexto, a pesquisa translacional concentra seus esforços em testar a segurança e a eficácia de produtos usados tradicionalmente, por meio da pesquisa laboratorial básica, com a finalidade de melhorar a saúde das populações do mundo. Desta forma, este estudo piloto vem com a oportunidade de novos direcionamentos nas pesquisas científicas, com um produto de origem natural, de baixo custo, além de contribuir com o reaproveitamento de material descartado nos bananais.
(Bio)2 - Sistema híbrido bioinspirado e biomimético à base de nanocelulose de origem microbiana e líquido iônico, para estabilização e entrega transdérmica de insulina
(2019) Jorge, Ludmilla Rodrigues Ribeiro
INTRODUÇÃO: Sistemas bioinspirados e biomiméticos à base de filmes biopoliméricos são interessantes para utilização farmacêutica em função de características como biocompatibilidade, biodegrabilidade, toxicidade quase nula e adequadas propriedades fisicoquímicas. A permeação tópica de fármacos pode ser otimizada através da incorporação de substâncias facilitadoras da permeação cutânea. Neste sentido, os líquidos iônicos são substâncias promissoras. A insulina é um hormônio que tem como função manter os níveis normais de glicose no sangue. A ausência ou produção parcial desse hormônio gera a hiperglicemia ou Diabetes Melittus (DM), doença crônica com elevada prevalência. Para o tratamento da DM tipo 1 é imprescindível o uso de insulina, a qual é administrada por aplicações subcutâneas. OBJETIVO: Desenvolver e avaliar um filme polimérico base de nanocelulose de origem microbiana e goma xantana para entrega tópica de insulina, tendo um liquido iônico como facilitador da permeação cutânea. MÉTODOS EXPERIMENTAIS: A nanocelulose bacteriana foi produzida por fermentação da bactéria Gluconacetobacter hansenii ATCC®23769, incorporada com insulina e caracterizada por adsorção de insulina, FTIR, XRD, DSC e TGA, FESEM, resistência mecânica, citotoxicidade, genotoxicidade e ensaio de permeação transdérmica via célula de Franz. Realizou-se a síntese e caracterização dos líquidos iônicos por citotoxidade, genotoxicidade, FTIR, TGA e DSC, teor de água, 1HRMN. Seguiu-se a produção e caracterização dos biofilmes com nanocelulose e goma xantana, integrando insulina e geranto de colina. A caracterização dos filmes foi realizada pelos ensaios de resistência mecânica, TGA e DSC, XRT e DESEM. Por fim, avaliou-se a capacidade de permeação transdérmica da insulina pelo ensaio de permeação em células de Franz. RESULTADOS E DISCUSSÃO: As biomembranas de nanocelulose produzidas mostraram-se seguras para a aplicação sobre a pele, com adequadas propriedades mecânicas. Foram obtidos líquidos iônicos com reduzida citotoxicidade e genotoxicidade nula. O filme biopolimérico desenvolvido apresentou adequadas propriedades fisico-quimicas e biológicas, com efetiva capacidade de permeação transdérmica da insulina. CONCLUSÃO: Obteve-se um bifilme polimérico com excelentes propriedades mecânicas, físico-quimicas e biológicas, com capacidade de liberação e permeação transdérmica de insulina. Deste modo, o produto desenvolvido apresenta potencial para a entrega de insulina através da pele humana por permeação transdérmica.
Nanopartículas de prata (AgNPs): efeitos sobre lesões de nervo periférico e músculo de roedores e avaliação de mutagenicidade (teste de Ames)
(2019) Moreno, Débora Antunes Neto
Introdução: As Nanopartículas de prata (AgNPs) possuem características antimicrobianas e esta razão tem inúmeras aplicações medicinais, incluindo lesões teciduais. Objetivos: Portanto o objetivo do trabalho foi avaliar a eficácia de AgNPs 50 nm em modelos experimentais de lesão e a toxicidade. Metodologia: Foram utilizados 2 (dois) modelos a) ex vivo, em preparações nervo frênico-diafragma de camundongos, usando como ferramenta farmacológica o veneno de Bothrops jararacussu (Bjssu, 60 μg/mL), reconhecidamente neurotóxico e miotóxico, através de técnica miográfica. Os músculos resultantes dos ensaios ex vivo foram analisados através de microscopia de luz e comparados com controle de solução nutritiva de Tyrode. b) in vivo, em modelo de queimadura de segundo grau induzido por um dispositivo metálico através de contato térmico, em ratos. A recuperação da lesão causada por queimadura foi comparada macroscópica e diariamente por 28 dias frente ao tratamento com AgNPs e comparado com salina (não tratado). Nos 7º, 14º, 21º e 28º dias, dois animais de cada grupo foram sacrificados e a área da queimadura foi analisada macroscopicamente (análise de imagem – fotografia) e por microscopia de luz. Foi analisado a toxicidade e mutagenicidade: O teste de Ames foi conduzido com e sem ativação metabólica, em misturas de veneno com AgNPs e comparadas com controles de veneno e AgNPs, isoladamente, após ensaios preliminares de toxicidade. Resultados: Na JNM apenas 37,2 ± 6,0% das fibras musculares mostraram-se fisiologicamente ativas perante a exposição ao veneno, ao final de 120 minutos, enquanto a neutralização deste efeito do veneno, pelas AgNPs, garantiu o funcionamento de 74,7 ± 4,3% das fibras musculares. Nas queimaduras, as AgNPs não apresentaram diferença significativa na cicatrização da queimadura, nem no peso dos fígados dos animais, entretanto foi observada a presença de hemorragias na cavidade abdominal dos animais E7 e diferenças na coloração e consistência dos mesmos, mostraram diferenças em níveis de GSH, podendo indicar hepatotoxicidade. As AgNPs na ausência de ativação metabólica não apresentaram mutagenicidade a nenhuma cepa. Entretanto, quando ativados metabolicamente elas mostraram-se mutagênicas nas cepas TA98 e TA100. O veneno de Bjssu, na ausência do sistema de metabolização mostrou-se mutagênico à cepa TA100. Quando acrescentou-se o sistema de metabolização mostrou-se mutagênico em todas as cepas. Na mistura, na ausência de ativação metabólica, não foram mutagênicos a nenhuma cepa. Entretanto, quando ativados metabolicamente elas mostraram-se mutagênicas nas cepas TA97a e TA98. Conclusão: Os resultados obtidos mostraram que as AgNPs foram eficazes contra o bloqueio neuromuscular, mas não contra o efeito miotóxico, induzidos pelo veneno de Bjssu; não apresentou vantagens no processo de cicatrização da lesão causada por queimadura de segundo grau comparativamente ao soro fisiológico, ao final de 28 dias. Para o teste de Ames, os resultados em conjunto mostram que as AgNPs atenuam in vitro o efeito mutagênico do veneno.
Hidrogel com líquido iônico como carreador de bacteriófagos para tratamento de infecções profundas da pele
(2020) Campos, Welida Francielly de Camargo
A resistência bacteriana aos antibióticos é atualmente um grave problema de saúde pública em nível global, sobretudo em ambientes hospitalares. Os principais patógenos causadores das infecções resistentes aos antibióticos pertencem ao grupo ESKAPE (Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa e Enterobacter). Neste sentido, se faz necessário desenvolver alternativas capazes de combater essas infecções como a terapia fágica. Para o tratamento de infecções da pele e dos tecidos moles, pode-se empregar formulações tópicas. Contudo, muitas vezes, não há uma liberação adequada de ativos, pelo fato da pele atuar como uma barreira natural. Neste contexto, surgiram os líquidos iônicos como promotores de permeação cutânea, capazes de melhorar a entrega de agentes terapêuticos nas camadas mais profundas da pele. Para a administração de ativos por via dérmica, os hidrogéis são uma excelente alternativa por serem maleáveis, flexíveis e biocompatíveis, reduzindo a irritação dos tecidos naturais e permitindo a incorporação de substâncias que favoreçam a permeação cutânea. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um hidrogel contendo o líquido iônico oleato de colina e bacteriófagos líticos para Acinetobacter baumannii, para tratamento de infecções da pele. Para isso, dois bacteriófagos foram isolados e caracterizados, sendo posteriormente incorporados, juntamente com o oleato de colina, em hidrogel de alginato de sódio. A caracterização dos bacteriófagos foi realizada através de avaliação dos espectros líticos, eficiência de plaqueamento, curva de crescimento, capacidade de adsorção e análise de eletroforese em gel de poliacrilamida, microscopia eletrônica de transmissão e análise de difração de raios-X. O hidrogel foi caracterizado através de análises de difração de raios-X, espectrofotometria de infravermelho por transformada de Fourier, calorimetria diferencial de varredura, microscopia eletrônica de varredura e tomografia de raios-X. Por fim, foi avaliada a capacidade de permeação transdérmica dos bacteriófagos, pelo ensaio de permeação em células de Franz, e a citotoxicidade do hidrogel pelo método de difusão em ágar. Como resultado, ambos os bacteriófagos mostraram atividade lítica contra a cepa de Acinetobacter baumannii. O hidrogel produzido apresentou homogêneidade, maleabilidade, ausência de fraturas e efetiva capacidade de permeação transdérmica dos bacteriófagos. O hidrogel foi capaz de proteger e estabilizar entidades proteicas bioativas e, ao mesmo tempo, promover uma melhoria no processo de permeação cutânea.
Produção de nanocristais de celulose bacteriana para estabilização de sistemas baseado em nanoemulsões e transporte de fármacos
(2020) Soeiro, Victória Soares
Sistemas emulsionados sem surfactantes são ecologicamente corretos e podem ser aplicados na área farmacêutica e alimentícia. Os nanocomplexos são estruturas auto organizadas compostas por um polissacarídeo ou polímero e o fármaco. Dito isso, uma opção capaz de estabilizar emulsões e os nanocomplexos é a aplicação dos nanocristais de celulose (NCC), proveniente de celulose bacteriana. A celulose bacteriana é produzida pela bactéria Gluconacetobacter xylinus, é desprovida de lignina e hemicelulose, tem alta pureza química, cristalinidade, é inerte metabolicamente, atóxica e não alergênica. Entretanto, o processo de obtenção das NCC, mais utilizado, gera resíduos ambientais decorrente da utilização de técnicas por hidrólise ácida. Um método para obtenção de NCC, com melhores características e menores danos ambientais, é a hidrólise da celulose por via enzimática, utilizando celulase. Por esta razão, neste trabalho, foi realizada a produção de NCC por hidrólise enzimática e sua aplicação em sistemas emulsionados e em nanocomplexos. Adiante no texto o leitor irá encontrar em cada capítulo uma avaliação e aplicação dos NCC. No capítulo I trazemos o referencial teórico do trabalho, onde debatemos sobre emulsões, emulsões pickering e nanocristais derivados de celulose bacteriana. No capítulo II, os NCC foram produzidos, caracterizados e avaliados afim de obter a melhor metodologia. O material foi obtido por um tratamento mecânico e hidrólise enzimática em cinco etapas e avaliando os parâmetros: tamanho, PDI e potencial zeta. Na amostra final, foi realizada o teste de NTA, MEV e TEM. Os resultados da produção de NCC demonstraram que os NCC da terceira centrifugação, com 72 horas de hidrólise foram menores em relação a tamanho e PDI. Após a escolha da melhor opção, desenvolvemos o capítulo III onde foram estudados sistema emulsionado contendo alginato e óleo de rícino recoberto por NCC. Foram realizadas caracterizações por FTIR, DSC, potencial zeta, microscopia óptica e MEV, que comprovaram a incorporação do NCC no sistema. No capítulo IV os NCC foram aplicados em nanocomplexos de alginato e anfotericina B e caracterizados por tamanho, PDI, potencial zeta, DSC, FTIR, Espectrometria UV-vis, teste de hemólise e citotoxicidade. Os NCC foram incorporados nos nanocomplexos, com baixa agregação da anfotericina B e cito e hemotoxicidade. Analisando todos os resultados obtidos diante aos capítulos podemos concluir que a hidrólise enzimática é uma alternativa para produção de NCC a partir de celulose bacteriana, sendo o tratamento mecânico e as operações unitárias fundamentais na construção do processo do material; e na avaliação dos sistemas formados, é possível realizar o recobrimento pelos NCC e poderão se tornar um sistema de liberação controlada de medicamentos.
Avaliação in vitro da toxicidade de sistemas carreadores para o desenvolvimento de repelentes de longa duração em modelos 2D, co-cultura e 3D
(2020) Germano-Costa, Taís
O aumento dos relatos do número de casos de Dengue, Zika e Chikungunya, levou a novos estudos referentes ao desenvolvimento de repelentes alternativos contra insetos, visando maior eficácia e menor toxicidade. Mesmo com a eficiência dos produtos existentes e a fácil aplicação, atualmente a maior preocupação se dá em relação ao potencial tóxico dos produtos, tanto para os organismos como para o ambiente, principalmente devido a forma de utilização aleatória dos produtos. Conforme relatado na literatura existe cada vez mais evidências de que os repelentes de insetos podem desencadear interações indesejáveis com o sistema biológico, podendo gerar efeitos nocivos diretos aos organismos ou produção de metabolitos intermediários indesejáveis. Problemas com a biotransformação e bioacumulação dos compostos presentes nestes repelentes podem ser a causa de uma resposta tóxica do produto. Nesse contexto, o desenvolvimento de um repelente com base botânica pode ser uma alternativa viável e mais segura, aliado a isto, a utilização de nanopartículas de zeína pode atribuir a este maior tempo de atividade. O nanorepelente avaliado neste estudo é constituído por icaridina e geraniol, compostos que se destacam pela eficácia de repelência, porém apresentam citotoxicidade pronunciada, logo a encapsulação se deu com o intuito de reduzir seus efeitos tóxicos, originando um produto sustentável e seguro. O objetivo desse trabalho foi avaliar a toxicidade de nanopartículas de zeína contendo icaridina e geraniol (NP_I+G), em dois modelos de cultura in vitro utilizando diferentes linhagens celulares em forma de monocultura (cultura 2D) e co-cultura. Para isto, foram realizadas análises de citotoxicidade indireta através dos ensaios de redução do sal de tetrazólio com os reagentes MTT, MTS, WST-8 e direta por rompimento de membrana por exclusão com azul de Tripan. As análises de genotoxicidade foram realizadas por meio do ensaio Cometa, também foram realizadas avaliação do potencial inflamatório com a expressão gênica através da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (qPCR), utilizando primers específicos para os genes CXCCL-8 (IL-8), CCL22 (MDC), CCL5 (RANTES), CCL17 (TARC), NLRC4, NLRP3, AIM2 e ASC. Os resultados mostraram que as NP_I+G, quando avaliadas em culturas 2D, apresentaram viabilidade celular indireta acima de 70 % e direta acima de 95 %. A avaliação da genotoxicidade não apresentou diferença significativa, em relação ao controle, para culturas expostas as NP_I+G. Os resultados da avaliação do potencial inflamatório apresentaram diferenças significativas apenas para duas linhagens, a THP-1 onde as alterações foram observadas em todos os genes avaliados e na linhagem HT-29, onde não foram observadas alterações apenas na expressão do gene TARC. A avaliação em modelos de co-cultura mostrou viabilidade acima de 60 e 95 % para as técnicas indireta e direta, respectivamente, não sendo observadas diferenças significativas para a genotoxicidade após 6 horas. No entanto, na avaliação da linhagem THP-1 presentes no compartimento basal das coculturas compostas por insertos de A549, HaCaT e HT-29, apresentaram diferenças significativas, quando comparadas ao controle, em relação a expressão dos genes envolvidos com processos inflamatórios, indicando necessidade de mais estudos para que este nanorepelentes possa ser utilizado com segurança.
Síntese verde e avaliação de nanopartículas de ferro baseadas em Trichoderma harzianum visando aplicação na agricultura
(2020) Bilesky-José, Natália
A produção de nanomateriais aplicados a área agrícola está próximo de ser uma realidade, apresentando a possibilidade de aplicação da nova tecnologia como solução de problemas e consequente melhora no rendimento das culturas. A utilização de nanopartículas metálicas visando o controle de patógenos é recente, porém um dos problemas levantados seria em relação a sua toxicidade, tanto para o ambiente como para os organismos. Desta forma, visando menor toxicidade, existe a proposta de utilização de nanopartículas biogênicas, as quais apresentam um capping composto por biomoléculas provenientes do organismo redutor. As nanopartículas de ferro apresentam baixa toxicidade, o que permite sua aplicação no ambiente. O micoparasita Trichoderma harzianum é utilizado no controle biológico, este além do combate às pragas traz às lavouras outros benefícios como o crescimento de plantas, porém enfrenta os mesmos problemas de sensibilidade, como temperatura e radiação ultravioleta, que outras espécies utilizadas no controle de pragas. Portanto, este trabalho teve como objetivo realizar a síntese de nanopartículas de ferro (Fe0, α-Fe2O3 ou γ-Fe2O3) biogênicas utilizando o filtrado de T. harzianum como agente redutor e estabilizante com a finalidade de aplicação no controle da Sclerotinia sclerotiorum. Além da síntese, visa caracterizar as nanopartículas, avaliar sua toxicidade sobre diferentes linhagens celulares e microrganismos de importância agrícola e os seus efeitos sobre a cultura da soja. Para isto, foram sintetizadas cinco nanopartículas que apresentaram diâmetro médio entre 100 e 300 nm, índice de polidispersão entre 0,2 e 0,5 e potencial zeta positivo entre 2 e 17 mV. Das cinco nanopartículas obtidas, foi selecionada a nanopartícula que apresentou maior atividade contra o mofo branco, a NpFe-4, e a mesma foi utilizada nas avaliações seguintes. A nanopartícula selecionada apresentou, através do Espalhamento Dinâmico de Luz, diâmetro hidrodinâmico de 207,30 ± 1,94 nm, índice de polidispersão de 0,45 ± 0,07 e potencial zeta de 13,47 ± 2,05 mV. Em relação à atividade, foi capaz de inibir o crescimento micelial e a germinação de novos escleródios do mofo branco e acelerou o crescimento do T. harzianum. A nanopartícula não apresentou citotoxicidade nas linhagens celulares testadas, no entanto induziu baixa genotoxicidade em fibroblastos (3T3 e V79) em maiores concentrações. Também não causou redução do índice de germinação das sementes avaliadas, levando a poucas alterações nas plantas de soja, também não afetou as bactérias de importância agrícola (Bacillus thuringiensis, Pseudomonas aeruginosa, Bradyrhizobium japonicum) e o fungo Beauveria bassiana, assim como as bactérias envolvidas no ciclo do nitrogênio. Este trabalho traz bons resultados em relação ao potencial das nanopartículas biogênicas de óxido de ferro para o controle de pragas na agricultura, sendo uma possível promessa para contribuir com o controle biológico.
Isolamento, caracterização, estabilização estrutural/funcional e avaliação in vitro, de um novo bacteriófago contra Klebsiella pneumoniae multirresistentes
(2020) Moreli, Fernanda de Campos
Os bacteriófagos são vírus que infectam única e especificamente bactérias, sendo totalmente desprovidos de atividade metabólica. Ao contrário dos agentes antibióticos de amplo espectro, que funcionam indiscriminadamente, os bacteriófagos visam especificamente apenas certas espécies/cepas de bactérias, e é precisamente esta especificidade que torna os bacteriófagos muito atrativos para o combate de infecções por bactérias multirresistentes aos antibióticos. O trabalho de pesquisa desenvolvido objetivou o isolamento (a partir de fontes ambientais) e caracterização de um novo bacteriófago com amplo espectro lítico capaz de infectar Klebsiella pneumoniae. Foram utilizadas fontes de esgoto hospitalar na região de Sorocaba (Brasil), para a pesquisa e isolamento de bacteriófagos líticos. A caracterização físico-química das partículas bacteriofágicas isoladas incluiu análises via verificação de lise bacteriana (em cepas de Klebsiella pneumoniae resistentes a antibióticos, provenientes de isolados clínicos), varredura espectral UV-Vis para determinação do coeficiente de extinção molar das partículas fágicas, DRX, eletroforese SDS-PAGE e MET, enquanto a caracterização biológica abrangeu a avaliação da sua gama de hospedeiros usando culturas bacterianas de Klebsiella pneumoniae tanto provenientes de coleção como de 26 isolados clínicos (humanos) assim como de outras espécies bacterianas provenientes de coleção, determinação da eficiência de plaqueamento (EOP), determinação da curva de crescimento em um só ciclo síncrono (OSGC) para cálculo do período latente, período de eclipse, período de acumulação intracelular e tamanho de explosão, determinação da curva de adsorção para cálculo da taxa de adsorção das partículas bacteriofágicas em sua célula hospedeira bacteriana, e avaliação da capacidade de inativação bacteriana in vitro pelas partículas fágicas utilizando valores de MOI de 1 e 1000. As partículas do bacteriófago isolado exibiram um amplo espectro lítico contra as cepas multirresistentes da bactéria em estudo. O uso do bacteriófago isolado possui vantagens inerentes pelo fato de ser um predador bacteriano natural, específico e estritamente lítico, que reconhece rápida e especificamente seu hospedeiro bacteriano, o que leva a um resultado cada vez mais difícil de obter com os antibióticos químicos atuais.
Efeito da associação finasterida e blend contendo fatores de crescimento pelo parâmetro da mutagenicidade (teste de Ames)
(2020) Constantino, Ederson
Introdução: A alopecia androgenética (AAG) é uma condição que interfere na qualidade de vida, na autoestima e na vida social do indivíduo acometido. A busca pelo melhor tratamento para erradicar ou minimizar a queda de cabelo depende da segurança do seu uso. Para aferir segurança a um composto ou a uma mistura devese conhecer a sua toxicidade, incluindo a genotoxicidade, e o ensaio Salmonella/microssoma é recomendado para esta finalidade. Objetivos: O objetivo desse estudo foi verificar a segurança da combinação finasterida com um blend contendo fatores de crescimento, através do parâmetro Salmonella/microssoma (teste de Ames). Metodologia: As concentrações de Finasterida (50 mg/mL), blend de fatores de crescimento (1,2 mg/0,1 mL) e a associação Finasterida + blend (50 mg/mL, cada) foram preliminarmente ensaiadas em limite máximo preconizado pelas agências regulatórias (5 mg/placa) com a linhagem S. typhimurium TA100 para o teste de toxicidade. Posteriormente realizou-se o ensaio em linhagens de TA97a, TA98, TA100 e TA102, na ausência (-S9) e na presença (+S9) de ativação metabólica exógena. Os resultados foram analisados estatisticamente com controles (positivo de cada linhagem, negativo e espontâneo) e os índices de mutagenicidade (IM2,0) calculados. Todos os ensaios foram realizados em triplicata. Resultados: Os valores máximos de 5 mg/placa de Finasterida, do blend e da associação não apresentaram toxicidade à linhagem TA100. No Teste de Ames, sem ativação metabólica, a finasterida, o blend e a associação não se mostraram mutagênicos nas linhagens testadas. Na presença de ativação metabólica, o blend apresentou mutagenicidade dependente da concentração, sendo segura de 0,12 a 0,000012 mg/placa após sofrer diluições em série. Entretanto, quando em mistura com concentração fixa de finasterida (5 mg/placa), o resultado foi positivo para a linhagem TA98 e TA100, indicando a participação de metabólitos da finasterida na mutagenicidade. Conclusão: O blend comercial estudado não mostrou ser um mutágeno direto, por não apresentar mutagenicidade na ausência de ativação metabólica. Entretanto, na presença de ativação metabólica, concentrações 1,2 mg/placa do blend resultaram em falso-positivo de mutagenicidade por conter em sua composição, histidina no complexo de cobre, que foi completamente atenuado em concentrações de 0,12 a 0,000012 mg/placa, consideradas seguras. Mesmo em concentrações seguras do blend, a associação com a finasterida induziu mutação reversa nas cepas TA98 e TA100 (+S9), cujas evidências da literatura, pode ter sido causada pelo metabólito finasterida-ω-ácido-óico.
Comparação entre o chá verde em infusão e o chá verde incorporado em cristal líquido liotrópico em modelo animal submetido a treinamento intervalado de alta intensidade
(2021) Nieri, Vitor
O chá verde é, dentre as formas de extração e preparo, a que mais protege os constituintes naturais da planta Camellia Sinensis, um potente antioxidante natural. Contudo, após o preparo, sua atividade antioxidante está sujeita a ações de degradação oxidativa. Os sistemas a base de cristal líquido liotrópico (NPCLL) são sistemas nano-particulados, auto-organizados e bioativos que podem proteger a degradação dos constituintes naturais do chá verde, além de otimizar a sua absorção e ação biológica por possuírem características biomiméticas. O exercício físico (EF) é benéfico a saúde, contudo aumenta a produção de espécies reativas de oxigênio (ERO). O treinamento intervalado de alta intensidade (HIIT) é uma modalidade de exercício conhecida pela alta produção de EROs e o consumo de antioxidantes é associado com a neutralização dos seus efeitos deletérios. Contudo, reações adaptativas ao EF são intermediadas por EROs e suprimi-las pode levar a redução de adaptações inerentes ao estímulo do EF. Assim, o objetivo foi avaliar o efeito do chá verde e do NP-CLL veiculando chá verde em modelo animal de exercício HIIT sob os parâmetros bioquímicos, estresse oxidativo, performance e de peso corporal. Três marcas comerciais tiveram sua atividade antioxidante avaliada e a marca com maior potencial foi utilizada para a preparação das NP-CLLs na combinação de monoleína (Myverol 18-99) como fase oleosa, chá como fase aquosa e polaxamer 407 como tensoativo. Ratos machos, Wistar, foram divididos aleatoriamente em 6 grupos: I - Controle; II - Chá verde; III – NP-CLL+Chá verde; IV – Exercício; V – Exercício + Chá verde; VI – Exercício + NP-CLL+Chá verde. Todos os animais que se exercitaram aumentaram a massa muscular e reduziram o ritmo de aumento do ganho de peso corporal em relação ao controle. Os animais do grupo V e do grupo VI ganharam mais massa muscular e condicionamento físico em relação ao grupo IV. Além disso, o grupo III mostrou redução no triglicerídeo e no ritmo de ganho de peso, resultados não encontrados no grupo II. Assim, a suplementação dos animais com chá verde e com NP-CLL+chá verde potencializou a performance, a hipertrofia muscular e a perda de peso dos animais submetidos ao HIIT. As NP-CLL+chá verde resultaram na melhora de parâmetros aos quais o chá verde não obteve efeito. Então, a suplementação de chá verde e de NP-CLL+chá verde não mostrou efeitos negativos em resposta ao HIIT e ainda potencializou os efeitos esperados do exercício. Além disso, a redução do triglicerídeos e no ritmo do ganho de peso encontrados no grupo III são promissores e precisam ser melhor investigados.

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